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建库 电转化
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| 请问 建库一定要做电转化吗？我想做对一个基因的改造，利用引物上的几个随机碱基进行基因改造，建一个库 ，然后在筛选，是不是用普通转化的话库容量不够啊？要做电转化才能保证库容量？ |
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whui
至尊木虫 (著名写手)
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事实上化转也可以达到9~10次方，但基本属于可遇不可求：）并且这只是在转化标准质粒的情况下得到，如果是连接产物，要降低1~2个数量级。 通常商品化感受态在8次方（质粒），按这个标准转化连接产物，能得到10E5~6次方库容（每个转化），如果你想得到>8次方库容，至少要做上百次转化：） 具体到你的问题，你可以大概计算下你所需的理论库容：每个随机位点最多四种可能（N=A/G/C/T;）几个随机碱基理论上总共会产生多少组合，再乘以1000（转化和筛选造成的损失），基本就是理论库容。如果库容在6次方一下，也可以化转。当然，任何时候都是建议：库容越大越好！ Good luck！ |
3楼2012-09-05 13:50:49
2楼2012-09-05 06:54:53
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