| 查看: 3709 | 回复: 11 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
tzaixmc木虫 (正式写手)
|
[求助]
基因克隆表达中信号肽的问题
|
|||
| 我最近想在大肠杆菌BL21中表达其他细菌的蛋白，用pet系列的载体。我的目的基因自身带有一段信号肽序列，我的目的是检测这种蛋白具有目的活性就行（不管是分泌型的还是不分泌的）。我想问的是我要设计引物的时候要去掉信号肽的部分吗？我可不可以选不带有信号肽的pet载体，把目的基因自身的信号肽也一起克隆进去？如果克隆进去的信号肽不能被切除是否会影响蛋白的活性？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子问题及解决方案汇总 | 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有99人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
-
推荐一些基础有机化学的实验教程
已经有0人回复
-
探秘高分子世界：链动微观，筑就材料新篇
已经有0人回复
-
科研赋能时尚宠物：检测护航，焕新养宠体验
已经有0人回复
-
精测粗蛋白：以科研标尺，守品质核心
已经有0人回复
-
解码碳水世界：科研探秘，赋能营养与应用
已经有0人回复
-
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
蛋白激酶原核表达
已经有14人回复- 关于毕赤酵母pPICZaA载体
已经有7人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- 膜蛋白表达问题
已经有15人回复
- 【推荐】973 三维培养干细胞自我更新与定向分化的调控网络
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于信号肽的问题
已经有10人回复
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 58
- 应助: 388 (硕士)
- 贵宾: 0.238
- 金币: 17138.7
- 红花: 43
- 帖子: 2251
- 在线: 712.4小时
- 虫号: 111074
- 注册: 2005-11-20
- 专业: 生物化学
10楼2012-09-04 17:44:16
lidonghong
金虫 (正式写手)
- 应助: 116 (高中生)
- 金币: 2071.8
- 散金: 21
- 红花: 2
- 帖子: 403
- 在线: 167.6小时
- 虫号: 1098160
- 注册: 2010-09-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2012-09-02 22:08:03
tzaixmc
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 2991.1
- 红花: 2
- 帖子: 830
- 在线: 197.9小时
- 虫号: 977490
- 注册: 2010-03-21
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2012-09-03 09:55:21
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 58
- 应助: 388 (硕士)
- 贵宾: 0.238
- 金币: 17138.7
- 红花: 43
- 帖子: 2251
- 在线: 712.4小时
- 虫号: 111074
- 注册: 2005-11-20
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 专家，好久没见了哦 2012-09-03 13:47:28
tzaixmc: 金币+5 2012-09-03 19:38:22
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 专家，好久没见了哦 2012-09-03 13:47:28
tzaixmc: 金币+5 2012-09-03 19:38:22
|
1、信号肽最好去掉，没有去掉的话很大的可能表达出来是没有活力的，因为宿主不能识别这个信号肽序列，不会把信号肽切割，表达出来的是带信号肽的蛋白，不是你要的成熟蛋白，对活性一般是有影响的。 2、不一定要选择带信号肽的质粒，你如果要让蛋白分泌的话可以选择pet20等，如果如果想融合表达的话pet32、39都可以，如果没有这些要求，pet28是个不错的选择。 |
4楼2012-09-03 10:01:37