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胡小喜

新虫 (小有名气)

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[交流] 平板涂布要等到琼脂凝固到什么程度啊

最近开始做微生物，听说涂布法比倒平板法好，所以用平板法，第一次涂布时我等琼脂凝固七八成时加100ul涂布，结果琼脂被涂破了，第二次我等了1h后去涂布，琼脂比较结实，没涂破，结果涂完后，等30min去取时，发现琼脂表面有菌液在移动，像没有被琼脂吸收一样，这该怎么办呀，我怕一倒置，菌液都流到培养皿盖了。望有经验的人指导下啊！菌液要减少用量吗，还是说不要琼脂太凝固了才接种？那样的话一涂布琼脂就花了呀

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zzjcust

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1楼 2012-08-22 20:21:27

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wanglei512

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-08-23 05:49:26
等平板凝固完全之后再涂，要不然会破。菌液当然也是不能太多的，最好是能够涂均匀整块平板，一边涂一边计时，一分钟能干就好。不能吹干，因为菌液集中会长成几个微生物长在一起，分不开，所以最好是一直涂到干才停。

倒板子要在超净工作台里面进行，等到不烫手的时候再倒，产生的雾气和水珠很少，而且把盖子打开一半。凝固很快的，不到10分钟就好了。如果雾气还很多，可以放到培养箱里孵育上30min-1h。新倒的板子就是不好凃干，涂得时间稍微长一点，如果在冰箱（4度）放上3天左右，不到30S就干了。板子容易涂破，一是你的琼脂加少了或者板子倒的太薄、太厚。二是你涂得手法不太好，时间长了就好了。我们一般200ML里加3g琼脂。300ML倒7-8个板子（90的）