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761429495

新虫 (小有名气)

[求助] 组氨酸标签的问题 已有1人参与

亲,怎样验证组氨酸标签有没有加到目的基因上,初学者 ,求指导
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每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
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tanglian8655

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极应助 2012-08-22 15:09:51
引用回帖:
13楼: Originally posted by 761429495 at 2012-08-21 09:36:48
在PPIC-9K上啊,难道在这个载体上的基因不能用组氨酸标签纯化吗?...

不是不能用组氨酸标签纯化,如果你一定要用这种纯化方式,你应该考虑几方面:一、你的基因上是不是本身就带有组氨酸标签,如果有,你可以直接纯化;二、如果你基因上没有,就看你的载体上是不是含有组氨酸标签,如果有,就直接做;三、如果前两者都没有,你可以考虑重新构建一个载体,把目的基因从载体上切下来或者设计PCR引物扩增出来,选择一个含有组氨酸标签的载体,比如pET30a,连上去重新构建。这样就可以解决你的问题了

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15楼2012-08-21 11:55:48
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将连好的质粒送公司测序就可以知道是否连上标签了
2楼2012-08-19 21:10:45
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761429495

新虫 (小有名气)

谁能给我说说从目的基因开始加组氨酸标签开始一直到粗酶液的获得大体有哪些步骤啊
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
3楼2012-08-19 21:16:32
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 761429495 at 2012-08-19 21:16:32
谁能给我说说从目的基因开始加组氨酸标签开始一直到粗酶液的获得大体有哪些步骤啊

粗酶液是什么?我们还不知道你的基因是干嘛的呢,说详细点,不然帮不上。
4楼2012-08-20 14:31:12
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