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有人用HPLC分析过睾酮吗?保留时间差异大,是睾酮不稳定吗?
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IMJane
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有人用HPLC分析过睾酮吗?保留时间差异大,是睾酮不稳定吗?
我用的是1%甲酸水和纯乙腈为流动相,梯度洗脱。
睾酮是用DMSO溶解,再用甲醇配成working solution。
Angilent ODS C18 column,UV 检测器。
目前存在的问题是,睾酮的保留时间不稳定,每天内跑的保留时间稳定,但是每天之间跑的保留时间相差2分钟左右。
这是为什么呢?有人同样做过睾酮吗?求交流~~求指点~~
谢谢~
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柱温不同,温度会有差异,另pH值是否用酸度计控制
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2012-08-17 21:14:48
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Originally posted by
zhenhuixian
at 2012-08-17 21:14:48
柱温不同,温度会有差异,另pH值是否用酸度计控制
温度定为30C,pH不是用酸度计控制,只是按体积比甲酸:水=1:1000的比例。每次都新配的流动相。
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4楼
2012-08-18 14:28:03
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柱子平衡好了吗
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Originally posted by
kennywong
at 2012-08-20 08:50:19
柱子平衡好了吗
每次都平衡好了。就是有时候保留时间不同。
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2012-08-20 17:41:21
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2012-08-31 23:32:32
tR相差2分钟,远超出系统误差范围,同样条件不同时间做一般小于0.1min。
这种情况应该是流动相比例或极性不稳定所致。
只要依然是单一的峰,那这个成分就是稳定的。
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7楼
2012-08-31 12:47:30
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睾酮挺稳定的 你的分析方法有问题
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8楼
2014-03-19 13:13:24
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黑白键mama
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8楼
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Originally posted by
可可西里
at 2014-03-19 13:13:24
睾酮挺稳定的 你的分析方法有问题
请问您做过睾酮的实验或者对睾酮处理细胞有了解吗?本人最近实验有做睾酮处理细胞,努力了几个月,结果总是一次一个实验结果,所以想请教您看看,麻烦看到一定要回复我一下哦,打扰了
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9楼
2016-07-25 15:22:58
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hf20160910
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你的流动相配制比例有问题,你每次配的比例不一样。
我猜你是手混流动相,单通道运行
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10楼
2016-08-10 22:12:32
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