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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 有人用HPLC分析过睾酮吗？保留时间差异大，是睾酮不稳定吗？
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IMJane

新虫 (初入文坛)

[交流] 有人用HPLC分析过睾酮吗？保留时间差异大，是睾酮不稳定吗？

我用的是1%甲酸水和纯乙腈为流动相，梯度洗脱。
睾酮是用DMSO溶解，再用甲醇配成working solution。
Angilent ODS C18 column，UV 检测器。
目前存在的问题是，睾酮的保留时间不稳定，每天内跑的保留时间稳定，但是每天之间跑的保留时间相差2分钟左右。
这是为什么呢？有人同样做过睾酮吗？求交流~~求指点~~
谢谢~
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1楼 2012-08-17 17:22:18
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zhenhuixian

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
柱温不同，温度会有差异，另pH值是否用酸度计控制
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2楼2012-08-17 21:14:48
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-08-20 09:39:12
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3楼2012-08-18 13:06:41
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IMJane

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenhuixian at 2012-08-17 21:14:48
柱温不同，温度会有差异，另pH值是否用酸度计控制

温度定为30C，pH不是用酸度计控制，只是按体积比甲酸：水=1:1000的比例。每次都新配的流动相。
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4楼2012-08-18 14:28:03
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kennywong

木虫 (正式写手)
柱子平衡好了吗
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5楼2012-08-20 08:50:19
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IMJane

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kennywong at 2012-08-20 08:50:19
柱子平衡好了吗

每次都平衡好了。就是有时候保留时间不同。
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6楼2012-08-20 17:41:21
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
IMJane: 金币+1, 谢谢你的评论。对我比较有帮助。 2012-08-31 23:32:32
tR相差2分钟，远超出系统误差范围，同样条件不同时间做一般小于0.1min。
这种情况应该是流动相比例或极性不稳定所致。
只要依然是单一的峰，那这个成分就是稳定的。
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7楼2012-08-31 12:47:30
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可可西里

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
睾酮挺稳定的  你的分析方法有问题
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8楼2014-03-19 13:13:24
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黑白键mama

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 可可西里 at 2014-03-19 13:13:24
睾酮挺稳定的  你的分析方法有问题

请问您做过睾酮的实验或者对睾酮处理细胞有了解吗？本人最近实验有做睾酮处理细胞，努力了几个月，结果总是一次一个实验结果，所以想请教您看看，麻烦看到一定要回复我一下哦，打扰了
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9楼2016-07-25 15:22:58
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hf20160910

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的流动相配制比例有问题，你每次配的比例不一样。
我猜你是手混流动相，单通道运行
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10楼2016-08-10 22:12:32
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