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IMJane

新虫 (初入文坛)


[交流] 有人用HPLC分析过睾酮吗?保留时间差异大,是睾酮不稳定吗?

我用的是1%甲酸水和纯乙腈为流动相,梯度洗脱。
睾酮是用DMSO溶解,再用甲醇配成working solution。
Angilent ODS C18 column,UV 检测器。
目前存在的问题是,睾酮的保留时间不稳定,每天内跑的保留时间稳定,但是每天之间跑的保留时间相差2分钟左右。
这是为什么呢?有人同样做过睾酮吗?求交流~~求指点~~
谢谢~
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zhenhuixian

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
柱温不同,温度会有差异,另pH值是否用酸度计控制
2楼2012-08-17 21:14:48
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匿名

用户注销 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-08-20 09:39:12
本帖仅楼主可见
3楼2012-08-18 13:06:41
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IMJane

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenhuixian at 2012-08-17 21:14:48
柱温不同,温度会有差异,另pH值是否用酸度计控制

温度定为30C,pH不是用酸度计控制,只是按体积比甲酸:水=1:1000的比例。每次都新配的流动相。
4楼2012-08-18 14:28:03
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kennywong

木虫 (正式写手)


柱子平衡好了吗
5楼2012-08-20 08:50:19
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IMJane

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
5楼: Originally posted by kennywong at 2012-08-20 08:50:19
柱子平衡好了吗

每次都平衡好了。就是有时候保留时间不同。
6楼2012-08-20 17:41:21
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
IMJane: 金币+1, 谢谢你的评论。对我比较有帮助。 2012-08-31 23:32:32
tR相差2分钟,远超出系统误差范围,同样条件不同时间做一般小于0.1min。
这种情况应该是流动相比例或极性不稳定所致。
只要依然是单一的峰,那这个成分就是稳定的。
7楼2012-08-31 12:47:30
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
睾酮挺稳定的  你的分析方法有问题
8楼2014-03-19 13:13:24
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黑白键mama

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 可可西里 at 2014-03-19 13:13:24
睾酮挺稳定的  你的分析方法有问题

请问您做过睾酮的实验或者对睾酮处理细胞有了解吗?本人最近实验有做睾酮处理细胞,努力了几个月,结果总是一次一个实验结果,所以想请教您看看,麻烦看到一定要回复我一下哦,打扰了
9楼2016-07-25 15:22:58
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hf20160910

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的流动相配制比例有问题,你每次配的比例不一样。
我猜你是手混流动相,单通道运行
10楼2016-08-10 22:12:32
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