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huiyu207

金虫 (小有名气)

[求助] UPLC 使用过程中峰型异常问题

我最近在使用H-Class时碰到些问题。

以下为检测条件:

Column: Waters Acquicity Uplc BEH C18 2.1*50mm 1.7um
Time(min)        5m M Na2B4O7 in H2O(PH=8.5)        ACN        Elution
0-4        66        34        Isocratic
4-6        66-40        34-60        Linear Gradient
6-10        40        60        Isocratic
Flow: 0.3ml/min   Temp:40C       Detection:215nm             Volume:2ul   Post time:5min
刚开始做的谱图为


后来做的谱图为:

主峰峰型变得宽胖,我以前实验的时候发现用100%的有机相溶解样品后会发生此现象,后来在方法设计中就使用ACN:H2O=1:1的样品溶液来溶解样品,但这次做的时候明明也是用的该溶液,但峰型就还是不正常,请问除了溶剂效应外还会有其他什么影响不?你们在使用过程中是否碰到过此类问题?

我试过更换PH,换过在线过滤器,溶液都换新的,都没什么用处,色谱柱应该不会坏。没做几次。



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jyp2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不知道楼主该问题解决了没有?
试试直接使用初始比列的流动相溶解样品进样?
或者是否有部分管理连接存在额外死体积问题?
2楼2012-08-14 15:20:41
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