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qian86812

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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注册: 2011-02-27
专业: 环境工程

[求助] 非生物系学生但是实验需要想做定量PCR

我现在已经有了一特定海域藻类普通PCR测序的结果，然后我想对其中藻类的三个门（甲藻、硅藻、蓝藻）做定量PCR看下三个门的比例如何，那我现在需要准备什么呢？引物可以用我原来普通PCR的引物不？质粒我又要怎么得到？普通PCR跟定量PCR的步骤区别就是引物、酶还有条件不一样吗？小白一个，请各位大神帮忙！！！！不用反转录的，用DNA做的

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1楼 2012-08-09 19:43:44

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xiadongliang

金虫 (正式写手)

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虫号: 433819
注册: 2007-08-18
性别: GG
专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

首先，需要保证定量PCR的扩增产物大小在200bp左右。
其次，保证引物对三个门的藻类具有特异性。
再者，就是定量PCR的试剂和仪器了。PCR和定量PCR总的来讲才做类似，主要是引物扩增片段有所要求，使用的试剂和仪器不同。还有就是需要后续的数据分析。

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2楼2012-08-10 10:47:16

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