| 查看: 1278 | 回复: 6 | |||
[交流]
湿地植物根际土壤微生物总DNA提取
|
|||
|
最近在提取湿地土壤微生物总ＤＮＡ提取，参考文献后想用以下步骤：称取土壤 0. 25g 至 2mL Eppendorf 管中, 用1mL pH8. 0 的PBS 缓冲液洗涤2 次。加入玻璃珠0. 5g 和 1mL 裂解液( CTAB 5% , SDS 1%, EDTA0. 1mol/ L, N aCl 0. 1mo l/ L, pH 8. 0) , 轻微振荡混合均匀后旋涡振荡2min; 10000g 离心1min,吸取上清液,加入NH4Ac至浓度2.5M,混合均匀4 ℃ 保温30min; 10000 g 离心 5min, 小心吸取上清液至干净的 1. 5mL Eppendorf 管中, 加入等体积异丙醇, -20℃ 保温 30min, 10000g 离心 5min, 弃上清,用 pH8. 0 的T E 溶液200微升 溶解沉淀物; DNA溶液用葡聚糖凝胶 Sephadex G75 柱层析纯化-20℃ 保存。 希望熟知ＤＮＡ提取的大侠帮忙看一下，这个步骤中NH4Ac和异丙醇的作用是什么，据我了解到的他们都有沉淀DNA的作用，那“加入NH4Ac至浓度2.5M,混合均匀4 ℃ 保温30min; 10000 g 离心 5min, 小心吸取上清液至干净的 1. 5mL Eppendorf 管中”这一步不就把ＤＮＡ都丢弃了吗？ 求助了，求助了～～～ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有208人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- SDS高盐法提取土壤微生物——求教各位批评指正
已经有7人回复
- 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片
已经有7人回复
- 植物DNA提取
已经有15人回复
- 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)
已经有10人回复
- 植物干样DNA提取试剂盒
已经有15人回复
- 植物基因组DNA提取的一些疑问~
已经有10人回复
- 土壤微生物DNA提取
已经有4人回复
- 土壤微生物总DNA提取试剂盒选购
已经有29人回复
- 【求助/交流】提取DNA总提不出来
已经有23人回复
- 【求助/交流】提取的植物基因组DNA电泳图，疑问？？？
已经有17人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
DIY科研工具交流
+1/216
-
【高温摩擦磨损试验机】接样/预存款服务
+1/89
-
清华大学药学院卢磊课题组诚聘新药研发方向科研助理
+1/76
-
坐标武汉，代亲友发帖征结婚对象（男征女）
+1/73
-
南方科技大学力学与航空航天工程系杨灿辉课题组诚聘博士后
+1/63
-
中国计量大学集成电路与微系统国家高层次人才团队招收博士生
+1/51
-
北京某医药CRO公司招聘多肽/高分子/连续流合成经理
+1/43
-
南京-栖霞区-尧化门附件有房子出租吗？
+1/31
-
中国科学院大学杰青团队招聘脂质体代谢方向博士后
+1/30
-
中国科学院宁波材料所 诚聘博士后 低维材料方向 【长期有效】
+1/29
-
上海大学昝鹏教授、军事医学研究院伯晓晨研究员/倪铭副研究员 课题组招聘博士生
+2/24
-
坐标北京不异地
+3/22
-
中科院和北京工商大学招收2026博士/化学或生物背景
+1/20
-
杭州师范大学心理系赛李阳课题组招收2026年学术学位博士研究生
+1/9
-
广东以色列理工学院招聘博士后（风电场流动的计算流体力学）
+1/7
-
诚邀博士后合作研究人员
+1/5
-
同济大学电信学院，肖李课题组预招2027春季与秋季博士生。
+1/4
-
关于溴素的转移与滴加
+1/2
-
青岛理工大学高端装备健康监测与智能运维团队招收硕士
+1/2
-
苏州大学国际创新药学院毛思锋课题组招收-2026级“申请-考核”制博士生
+1/2
2楼2012-08-08 10:50:22
3楼2012-08-08 17:18:48
4楼2012-08-08 19:44:13
6楼2012-08-13 21:40:56
7楼2013-04-10 15:29:52
简单回复
2012-08-08 19:51
回复
