| 查看: 1302 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
湿地植物根际土壤微生物总DNA提取
|
|||
|
最近在提取湿地土壤微生物总ＤＮＡ提取，参考文献后想用以下步骤：称取土壤 0. 25g 至 2mL Eppendorf 管中, 用1mL pH8. 0 的PBS 缓冲液洗涤2 次。加入玻璃珠0. 5g 和 1mL 裂解液( CTAB 5% , SDS 1%, EDTA0. 1mol/ L, N aCl 0. 1mo l/ L, pH 8. 0) , 轻微振荡混合均匀后旋涡振荡2min; 10000g 离心1min,吸取上清液,加入NH4Ac至浓度2.5M,混合均匀4 ℃ 保温30min; 10000 g 离心 5min, 小心吸取上清液至干净的 1. 5mL Eppendorf 管中, 加入等体积异丙醇, -20℃ 保温 30min, 10000g 离心 5min, 弃上清,用 pH8. 0 的T E 溶液200微升 溶解沉淀物; DNA溶液用葡聚糖凝胶 Sephadex G75 柱层析纯化-20℃ 保存。 希望熟知ＤＮＡ提取的大侠帮忙看一下，这个步骤中NH4Ac和异丙醇的作用是什么，据我了解到的他们都有沉淀DNA的作用，那“加入NH4Ac至浓度2.5M,混合均匀4 ℃ 保温30min; 10000 g 离心 5min, 小心吸取上清液至干净的 1. 5mL Eppendorf 管中”这一步不就把ＤＮＡ都丢弃了吗？ 求助了，求助了～～～ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有191人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- SDS高盐法提取土壤微生物——求教各位批评指正
已经有7人回复
- 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片
已经有7人回复
- 植物DNA提取
已经有15人回复
- 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)
已经有10人回复
- 植物干样DNA提取试剂盒
已经有15人回复
- 植物基因组DNA提取的一些疑问~
已经有10人回复
- 土壤微生物DNA提取
已经有4人回复
- 土壤微生物总DNA提取试剂盒选购
已经有29人回复
- 【求助/交流】提取DNA总提不出来
已经有23人回复
- 【求助/交流】提取的植物基因组DNA电泳图，疑问？？？
已经有17人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
16年了，来看看大家
+1/198
-
双一流南京医科大学招计算机、AI、统计、生物信息等方向26年9月入学博士
+1/177
-
原子层沉积（ALD）磁控溅射PECVD等微纳代工服务：18817872921
+1/88
-
供应德国EXAKT艾卡特半导体导热散热材料三辊研磨机50 PLUS
+1/85
-
真诚找对象
+1/78
-
内蒙古大学能源材料化学研究院招聘2026年博士生
+1/74
-
中国地质大学（北京）王琳课题组招收2026年硕转博/申请-考核博士研究生-1月8日截止
+1/28
-
征女友 @长安
+1/21
-
SCI，计算机相关可以写
+1/21
-
SCI，计算机相关可以写
+1/20
-
太原理工大学电工部招聘老师-偏电类专业的博士们快来看啊
+1/17
-
SCI，计算机相关可以写
+1/17
-
杨老师招收联合培养硕士、博士生或客座学生
+1/16
-
重庆医科大学-药学院-新靶标教育部医药基础研究创新中心-药物化学2026年博士招生
+1/10
-
2026年黄河科技学院纳米功能材料研究所招聘
+2/8
-
河南师范大学科研助理岗位招聘
+1/8
-
[招募] 上海交通大学环境健康课题组科研实习生（环境健康与生物学大数据方向）
+1/5
-
北京工业大学材料学院吴玉锋教授、王长龙研究员招收博士研究生
+1/3
-
海南大学化学院—功能分子器件团队博士后招聘
+1/2
-
美国麻省大学电子工程系招收全奖博士生和博士后
+1/1
7楼2013-04-10 15:29:52
2楼2012-08-08 10:50:22
3楼2012-08-08 17:18:48
4楼2012-08-08 19:44:13