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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 接T载体转化
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sjjsy7

银虫 (小有名气)

[求助] 接T载体转化

最近在做水稻基因克隆，接T载体老是有问题，蓝白斑筛选也老是出问题，不是没有蓝斑就是什么都不长，有点小纠结，请问各位高手，做几步有什么需要注意的，转化啦涂斑了什么的？
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1楼2012-07-31 00:18:39
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weishu杯子

银虫 (初入文坛)
做连接时的片段浓度、反应温度和时间、转化时间和热激时间等都会影响最终结果的
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快乐源于生活!!
2楼2012-07-31 07:53:55
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sjjsy7: 金币+1 2012-07-31 23:23:36
这个你得好好跟你实验室的师兄师姐请教了，实验室的条件不太一样，也不知道你们用的是哪个公司的试剂盒，如果操作没问题的话，可以换个公司的试剂盒试试
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事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
3楼2012-07-31 09:52:53
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sjjsy7

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 霹雳光 at 2012-07-31 09:52:53
这个你得好好跟你实验室的师兄师姐请教了，实验室的条件不太一样，也不知道你们用的是哪个公司的试剂盒，如果操作没问题的话，可以换个公司的试剂盒试试

天跟！！
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4楼2012-07-31 12:34:27
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植物园园长

金虫 (小有名气)
换他们的零背景快速连接试剂盒吧，又快又好，基本都是阳线克隆。
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在路上～～Marketing!
5楼2012-07-31 12:37:04
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hp6096096

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实在不行！换个载体试试呗！
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6楼2012-07-31 21:40:30
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟
T-vector应该很好上的（如果保证能用)，还是你目的基因扩征后纯化的问题吧，或是浓度不够！
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Tobeornottobe,that'saproblem
7楼2012-08-02 15:02:32
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sjjsy7

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by niushuaiji at 2012-08-02 15:02:32
T-vector应该很好上的（如果保证能用)，还是你目的基因扩征后纯化的问题吧，或是浓度不够！

我估计是浓度有点低！！
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8楼2012-08-02 23:12:09
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