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殷灿灿

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白乳化问题

急、急、急,目前正在做关于蛋白乳化性的实验,离心法,郁闷了,分了三层,从上到下依次是什么层啊,乳化层在哪一层一般情况下,还有就是分层不规则,怎么计算高度或者体积啊,求高手帮助,感激不尽啊
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GC7272

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来 2012-07-31 20:06:27
方法1   不同pH值条件下粗蛋白的乳化性能测定
 粗蛋白的乳化性能,包括乳化活性和乳化稳定性,并以大豆分离蛋白为对照。用不同pH值(2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、6.5、7.0、8.0、9.0)的0.2 mol/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液配置0.2%的蛋白样品,取2 mL色拉油与6 mL待测溶液于均质机中10,000×g均质1 min,立即用微量取样器从底部取50 μL,用含0.1%SDS的相同缓冲液稀释成5 mL,震荡后立即用分光光度计在500 nm波长下测定吸光值A0;10 min后再取50 μL,用含0.1%SDS的相同缓冲液稀释成5 mL,摇匀后立即用分光光度计在500 nm波长下测定吸光值A10。
 EAI    ESI均可上网查询公式
 其中,T:2.303;D:稀释倍数,100;C:蛋白质浓度,0.2%; φ:油相所占的分数,0.25。
书到用时方恨少事非经过不知难
2楼2012-07-31 09:50:07
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斗心

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来,谢谢 2012-08-02 20:16:39
呵呵,这个可是很有技巧性的活。一般,上层是油,中间乳化层,下面是水层。原因,密度。要想好好分离,多从物理性质方面想吧。冻一冻,体积不好算,换间接称重,多琢磨吧。
3楼2012-08-02 00:15:27
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羽灵960

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请教一下楼主,我现在做的 酶解蛋白上清液测定乳化性,离心所得上清液按照体积比1:1,添加大豆色拉油,离心法测定乳化性,没有出现明显的乳化层,只有油层和水层。我是按照资料中所给的实验步骤做的,资料中测定的结果,乳化性达到70%。我反复做了好多次,都没有观察到明显的乳化层。
  请教楼主,你用的离心法测定乳化性,具体的操作方法。谢谢 925006907@qq.com 我的邮箱
4楼2013-10-08 10:45:32
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