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感受态细胞转化,50ul感受态细胞+50ulDNA,能成功吗?
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jackiey2
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感受态细胞转化,50ul感受态细胞+50ulDNA,能成功吗?
做大肠杆菌感受态转化,买回来的包装好的100ul/管感受态细胞,安照说明书上的从-70℃取出放冰上融化后分两管,但说明书上没说加多少DNA,忘了问前辈改加多少了(前辈后来特别重申是5ul),一时糊涂把切胶得来的50ulDNA全加进去了(挨骂)。请问,结果会怎么样?
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遗传
1楼
2012-07-27 15:47:57
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jackiey2
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19楼
:
Originally posted by
wjswj
at 2012-07-30 15:30:13
建议先看书,看资料。我觉得楼主还没有理解什么是转化,转化目的是什么。《分子克隆》必看。不要看别人怎么做就跟着做。PCR产物干嘛要加在感受态细胞里?还是先学基础知识在做实验吧,理解之后就知道该干什么了。
嗯,我是新手,在补基础知识呢。不管怎么样,这次的实验已经成功了,呵呵。烦请前辈,还有些什么书给小虫我推荐下吧,不胜感激!
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遗传
21楼
2012-08-03 15:40:01
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感谢参与,应助指数 +1
加太多了,先转化再说吧
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2楼
2012-07-27 15:51:00
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jackiey2: 金币+1,
★
有帮助, 谢谢了,是10%,我记住了。
2012-07-27 16:34:38
DNA加太多了,一般是不能超过体系的10%的,超过了转化效率会很低,像你这样加了这么多估计就危险了。
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3楼
2012-07-27 16:03:33
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chlorella409
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感受态撑死了
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2012-07-27 16:08:39
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