24小时热门版块排行榜    

查看: 2062  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jackiey2

铜虫 (正式写手)

[求助] 感受态细胞转化,50ul感受态细胞+50ulDNA,能成功吗?

做大肠杆菌感受态转化,买回来的包装好的100ul/管感受态细胞,安照说明书上的从-70℃取出放冰上融化后分两管,但说明书上没说加多少DNA,忘了问前辈改加多少了(前辈后来特别重申是5ul),一时糊涂把切胶得来的50ulDNA全加进去了(挨骂)。请问,结果会怎么样?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

遗传
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)

感受态撑死了
4楼2012-07-27 16:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

thunder00

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加太多了,先转化再说吧
2楼2012-07-27 15:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jackiey2: 金币+1, 有帮助, 谢谢了,是10%,我记住了。 2012-07-27 16:34:38
DNA加太多了,一般是不能超过体系的10%的,超过了转化效率会很低,像你这样加了这么多估计就危险了。
3楼2012-07-27 16:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiey2

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gelois at 2012-07-27 16:03:33
DNA加太多了,一般是不能超过体系的10%的,超过了转化效率会很低,像你这样加了这么多估计就危险了。

我把转化后的共100ul的细胞加了600ul的LB,培养1小时后加抗生素,也就是共700ul左右,再从中取100ul铺平板,长的都连成片了。
从一开始的100ul细胞了取了10ul,重新加入50ul活化细胞,再转化,铺板,还是连成一片,边缘出现单菌落。
遗传
5楼2012-07-27 16:43:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见