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关于液相色谱采用梯度洗脱，物质出峰时间的问题
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本人试验采用梯度洗脱，但是出峰时间很奇怪。流动相分别为水与乙腈 梯度条件：0-4min内水从95%降到5%；4-8min内水相从5%恢复到95%。 物质的出峰时间在4.7min出现。 重现性及峰形都很好。 但这个出峰时间是否很奇怪？请各位高手指教。。。。 |
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4楼2012-07-24 13:06:43
是不是不用梯度也行啊？ 2楼2012-07-24 11:58:06
鸭绿江畔
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xbqewpq: 金币+3, 经典！ 2012-07-24 14:31:25
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我猜测一下，你通过某种手段，得知你的待测峰，应该出现在0-4min内，但实际发现，每次都在4.7min出峰，你想知道是什么原因造成的？ 1. 这是最常见的情况： 你的色谱柱出口端到进检测器的距离是多少？也就是说这部分的PEEK管长度是多少？要知道，样品在这部分流动也算时间的。文献中，尤其是仪器厂家的文献，都不会提及这部分的长度。因为仪器厂家在做实验时，都会把仪器管路连接最优化，尽量减小死体积，以防止待测成分保留时间过长。 2. 这种情况就不常见了： 液相的泵出问题了，流动想的比例控制不准了。 但是我认为你的问题还是第一种情况，如果你就是想重复出文献的结论，尽量减少色谱柱出口到检测器之间的死体积。其实这个大可不必。 第二种情况吗？就只能请工程师了。自己不要擅自拆泵。 |
3楼2012-07-24 12:08:25
yugijiang
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5楼2012-07-24 13:31:02
