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chenwei8808

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质电泳为什么分离、浓缩胶6min左右就凝了（25℃），12%的胶很硬

蛋白质电泳为什么分离、浓缩胶6min左右就凝了（25℃），12%的胶很硬
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1楼 2012-07-21 14:24:17
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-08 03:15:13
胶主要的促凝剂是过硫酸铵和TEMED。这两样物质加入后都会很快凝固。但是浓缩胶凝的比分离胶凝固的更快。
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2楼2012-07-21 19:16:57
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是TEMED加得太多了？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-07-22 14:36:20
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wenzi6337

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
温度高时丙烯酰胺胶凝的快。
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4楼2012-07-22 15:13:18
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甘富

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-08 03:14:04
先加TEMED 再加APS 注意顺序 这个是催化反应 要快速操作 以防凝固
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实践出真知！
5楼2012-07-23 17:08:31
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-08 03:14:17
可以在加ap前，先将配好的混合液放到冰上预冷一下，这样操作就比较从容不迫了。
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6楼2012-07-23 21:37:27
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以适当减少TEMED的量！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
7楼2012-07-24 10:43:58
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pb06319

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-08 03:14:34
SDS-PAGE胶两个重要的试剂，交联剂APS(过硫酸铵)跟催化剂TEMED.正常来说12%以下的胶室温也要15min以上才能凝。因此应该是你的TEMED加多了，建议你少加点，按照1:2000比例加就可以了，仅供参考。
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8楼2012-07-24 20:08:53
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幻流心魇

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

上层胶稍微晚一会加TEMED，适当减少用量，核对一下顺序。就好了！
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9楼2012-10-07 12:15:42
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