应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重叠延伸PCR第一轮做出来了，但是第二轮P不出来
51/1返回列表
查看: 3987  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[交流] 重叠延伸PCR第一轮做出来了，但是第二轮P不出来

我现在要做重叠延伸，第一轮PCR的两个片段都P出来了，核酸电泳的位置也是正确的，但是第二轮PCR总是P不出来，跑电泳时在100bp及250bp左右有很亮的条带，但是我的目的片段是在1400bp左右！哪位大侠知道这是什么原因啊？！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-07-20 13:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by beer胖 at 2012-07-22 10:21:47
第一轮p出来以后回收的片段，不要用试剂盒里面的TE缓冲液洗脱，直接用无菌水洗。

这有影响吗？我们一直都是用试剂盒里的Elution buffer洗脱，没出现过这种情况，这是第一次，不知道什么原因啊
赞一下 回复此楼
14楼2012-07-22 13:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

mitocam

新虫 (正式写手)
★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
100bp和250bp的是什么？
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-21 06:44:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mitocam at 2012-07-21 06:44:45
100bp和250bp的是什么？

不知道啊，可能是引物二聚体吧，我们也很纠结那两条带是什么东西
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-21 09:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beer胖

新虫 (小有名气)
★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
第一轮两个片段的大小分别多少？
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-21 09:58:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭