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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tzaixmc: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2012-07-20 14:13:50
rainwander: MicEPI+1, 鼓励交流 2012-07-20 20:54:24
1.载体质粒你先切胶回收,之后CIAP,最后直接溶液回收就可以了。
2.关于连接体系,一般做10ul吧,黏性末端采用T4连接酶吧,我一般体现为:1ul 10Xbuffer,1ul 酶,0.5-1ul 载体,剩余的全加目的片段补足至10ul。10ul连接体系转化一管,你的转化效率有点低,我一般连接一管10ul能长几千个吧。要是不够的话,你就多连接几管,多作几个转化。
3.关于池保存,你可以将池洗下来的菌,添加适量培养基摇匀(我一般摇5-8h,转速高些)后取一些菌提质粒,也可以按你说的,待洗下来菌液的摇匀后,转接一些从新摇菌提质粒。
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
3楼2012-07-20 11:07:41
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