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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌细胞破碎
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研究生6969

金虫 (小有名气)

[求助] 真菌细胞破碎

请问真菌细胞破碎的方法？目的是提取胞内酶。
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读万卷书，不如行万里路
1楼 2012-07-17 20:43:34
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
研究生6969: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-20 10:45:46
不同真菌，方法不同。酵母类，研磨、超声波、冻融都可以，丝状真菌一般用研磨或超声波破碎。
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2楼2012-07-18 01:59:31
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guyanling

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-07-18 01:59:31
不同真菌，方法不同。酵母类，研磨、超声波、冻融都可以，丝状真菌一般用研磨或超声波破碎。

请问研磨是用研钵直接磨就可以吗，超声波破碎又需要哪些准备工作呢，我说的是丝状真菌，求指教
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3楼2013-07-21 08:13:20
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guyanling

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-07-18 01:59:31
不同真菌，方法不同。酵母类，研磨、超声波、冻融都可以，丝状真菌一般用研磨或超声波破碎。

请问丝状真菌超声波破碎之前需要做什么准备工作吗
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4楼2013-08-02 17:44:23
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robert-RBT

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by guyanling at 2013-08-02 17:44:23
请问丝状真菌超声波破碎之前需要做什么准备工作吗...

收集菌丝或孢子，配制合适的缓冲液等。
研磨一般是在液氮中进行，保持低温。如果为了提过研磨效果，可以加少量的石英砂。
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5楼2013-08-02 18:58:53
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guyanling

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by robert-RBT at 2013-08-02 18:58:53
收集菌丝或孢子，配制合适的缓冲液等。
研磨一般是在液氮中进行，保持低温。如果为了提过研磨效果，可以加少量的石英砂。...

就是说研磨就可以了，还是研磨后再超声，我在超声之前往里面加入了溶菌酶，不知道是不是有必要呢
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6楼2013-08-03 09:46:48
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研究生6969

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by guyanling at 2013-08-03 09:46:48
就是说研磨就可以了，还是研磨后再超声，我在超声之前往里面加入了溶菌酶，不知道是不是有必要呢...

不晓得，预实验试试
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读万卷书，不如行万里路
7楼2013-08-06 21:17:31
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任_强

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般真菌不建议用超声破碎，真菌不像细菌那么容易超声破碎。酶解法和液氮研磨都可以。真菌酶解建议用蜗牛酶。液氮研磨比较难操作，谁研过谁知道，做过一次液氮研磨之后都不想再做第二次，嘿嘿。但液氮研磨做得好的话能保护你想要的酶。液氮研磨只是第一步，你要根据后期提取胞内酶的方案选择破壁方法，以免影响目的酶的提取。具体方法搜文献或网上有，这里只提供思路。
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微生物行业的初学者，望大牛们不吝赐教
8楼2013-08-07 15:25:11
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