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jiely

新虫 (初入文坛)

[求助] 一张高效液相色谱图,如何分离这两个峰?有效期至2012年9月1日

一张高效液相色谱图,色谱条件为:
固定相:C18柱(5μm,250mm*4.6mm);柱温:25℃;移动相:甲醇/乙腈=1:1(v/v);流速:20μL。
求助,如何将4.331和4.607这两个峰分开呢?本人高效液相做得少,请求高人帮助,不甚感激!

高效液相色谱图

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化学达人
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liuyuanzuo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

改变流动相及其比例最靠谱了,加点水相进去,降低流动相的洗脱能力,适当延长出峰时间,就能达到分离了。
5楼2012-07-13 08:42:21
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wuzhen8318

银虫 (正式写手)

学生物的假小子

★ ★ ★
06233053: 金币+3, 楼主要求奖励 2012-09-06 11:00:39
1 流动相不合适,个人建议改变流动相比例,可能能将其分开;也可以可以试试走梯度,如0-4.3 min,4.3-10 min之类。
2 柱温30℃、35℃、40℃调试一下
2 可以通过调整流速达到更好的分离结果,如降低流速。
来自武汉的mm
2楼2012-07-12 14:45:43
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sicecream

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

改进流动相,梯度减缓 试下
或者换其他流动相,希望能帮到你
3楼2012-07-12 14:52:41
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humengyue

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2012-07-12 14:55:59
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jiely

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liuyuanzuo at 2012-07-13 08:42:21
改变流动相及其比例最靠谱了,加点水相进去,降低流动相的洗脱能力,适当延长出峰时间,就能达到分离了。

我也试用甲醇-水和乙腈-水做流动相,所有峰不到10分钟都出来完了,完全都分不开,加水洗脱能力好像更强啊。
化学达人
6楼2012-07-13 13:55:48
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nature2009

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

1.流动相不合适,加大水相
2.色谱柱的选择,从图分析,这两个物质是强极性的成分,建议购买适合分离强极性成分的柱子
7楼2012-07-13 15:01:51
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littlegao

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
06233053: 金币+3, 楼主要求奖励 2012-09-06 11:00:54
个人感觉流动相有点水(如甲醇:水=9:1)会不会好点... 再有就是你的流速是25ul?
8楼2012-07-13 15:16:14
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zhuyun0724

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

洗脱时间太短了,梯度洗,0-3,3-5,5-10分三段,3-5时间设长一点
GO!GO!GO!
9楼2012-07-13 15:53:42
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冻池

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

个人觉得改变下流动相,用乙腈和水,来个梯度洗脱,再降点流速,应该就差不多了吧。

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
各位大侠多多赐教
10楼2012-07-16 21:39:47
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