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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 一张高效液相色谱图，如何分离这两个峰？有效期至2012年9月1日
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jiely

新虫 (初入文坛)

[求助] 一张高效液相色谱图，如何分离这两个峰？有效期至2012年9月1日

一张高效液相色谱图，色谱条件为：
固定相：C18柱(5μm,250mm*4.6mm);柱温：25℃；移动相：甲醇/乙腈=1:1（v/v）；流速:20μL。
求助，如何将4.331和4.607这两个峰分开呢？本人高效液相做得少，请求高人帮助，不甚感激！

高效液相色谱图
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化学达人
1楼 2012-07-12 12:27:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuyuanzuo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

改变流动相及其比例最靠谱了，加点水相进去，降低流动相的洗脱能力，适当延长出峰时间，就能达到分离了。
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5楼2012-07-13 08:42:21
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普通回帖

wuzhen8318

银虫 (正式写手)

学生物的假小子
★ ★ ★
06233053: 金币+3, 楼主要求奖励 2012-09-06 11:00:39
1 流动相不合适，个人建议改变流动相比例，可能能将其分开；也可以可以试试走梯度，如0-4.3 min，4.3-10 min之类。
2 柱温30℃、35℃、40℃调试一下
2 可以通过调整流速达到更好的分离结果，如降低流速。
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来自武汉的mm
2楼2012-07-12 14:45:43
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sicecream

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

改进流动相，梯度减缓 试下
或者换其他流动相，希望能帮到你
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3楼2012-07-12 14:52:41
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humengyue

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2012-07-12 14:55:59
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jiely

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuyuanzuo at 2012-07-13 08:42:21
改变流动相及其比例最靠谱了，加点水相进去，降低流动相的洗脱能力，适当延长出峰时间，就能达到分离了。

我也试用甲醇-水和乙腈-水做流动相，所有峰不到10分钟都出来完了，完全都分不开，加水洗脱能力好像更强啊。
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化学达人
6楼2012-07-13 13:55:48
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nature2009

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

1.流动相不合适，加大水相
2.色谱柱的选择，从图分析，这两个物质是强极性的成分，建议购买适合分离强极性成分的柱子
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7楼2012-07-13 15:01:51
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littlegao

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
06233053: 金币+3, 楼主要求奖励 2012-09-06 11:00:54
个人感觉流动相有点水（如甲醇：水=9:1）会不会好点... 再有就是你的流速是25ul?
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8楼2012-07-13 15:16:14
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zhuyun0724

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

洗脱时间太短了，梯度洗，0-3,3-5,5-10分三段，3-5时间设长一点
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GO！GO！GO！
9楼2012-07-13 15:53:42
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冻池

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

个人觉得改变下流动相，用乙腈和水，来个梯度洗脱，再降点流速，应该就差不多了吧。

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
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各位大侠多多赐教
10楼2012-07-16 21:39:47
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