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急求：怎样确定蛋白和肽有没有结合？
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| 怎样确定一个4000多分子量的蛋白，是否与700多分子量的肽结合了？ |
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 肽类前处理 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+5, 感谢应助 ^^ 2012-07-11 21:58:54
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+5, 感谢应助 ^^ 2012-07-11 21:58:54
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简单的化，直接用MS检测。 配置不同ratio的蛋白和肽，使用MALDI和ESI检测。 如果能检测到两个分子量之和，那么判断有可能结合了。 同时（或然后）做对比实验，比如配置相同的溶液，分别不含蛋白或者肽。 尤其是分子量小的肽，以免肽自身在某个浓度的溶液中形成multiplemer与其他小分子的complex，最后分子量与蛋白和肽的分子量之和类似。 MALDI可以直接检测到single charged的complex 峰。 ESI的化看机器的检测范围。如果检测范围小于4000,那么直接检测到的是multiple charged 的分子量，最后通过人工或机器deconvolution推到出single charged 的分子离子峰。 然后使用LC-MS 分离检测，如果LC-MS能够分离检测到，那么就可以做NMR。对特殊的hydrogen bond进行表征。 最后，还可以培养结合后蛋白和肽的共晶，使用X-ray检测。 总结，查相关类似文献。 |
3楼2012-07-11 21:44:41
4楼2012-07-12 10:12:21
