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lhsophia

银虫 (小有名气)

[交流] 福林酚法测纳豆激酶活力 已有7人参与

我现在要测纳豆激酶的活力,通过查文献,看到常用的是琼脂糖-纤维蛋白平板法,但是这种需要凝血酶和尿激酶的表品,我觉得比较麻烦,因此想用福林酚法,不过不知道这种方法的准确性如何,感觉现在用这种方法的人还比较少,哪位虫子能帮帮我啊
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514646716

铜虫 (小有名气)

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2楼2012-07-11 10:24:21
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-11 22:19:53
用福林酚法理论上可以,但需要体现纳豆激酶这种特定蛋白酶的活性而不是样品中总蛋白酶活性,使用纤维蛋白当底物或许可以。不知纤维蛋白好不好买到。有些文献使用专门的带显色基团的5肽当底物,直接比色法反映纳豆激酶活性,这种底物不便宜。
3楼2012-07-11 19:46:43
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lhsophia

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huangjixiang at 2012-07-11 19:46:43
用福林酚法理论上可以,但需要体现纳豆激酶这种特定蛋白酶的活性而不是样品中总蛋白酶活性,使用纤维蛋白当底物或许可以。不知纤维蛋白好不好买到。有些文献使用专门的带显色基团的5肽当底物,直接比色法反映纳豆激 ...

若是用纤维蛋白当底物的话,那酶解产物是什么啊,
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4楼2012-07-11 21:40:02
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

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我在的实验室是用平板做的,纤维蛋白原这些底物都很贵,而且通过透明圈的大小觉得也不是特别准确。
5楼2012-07-12 11:06:02
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lhsophia

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 陈年芬芳 at 2012-07-12 11:06:02
我在的实验室是用平板做的,纤维蛋白原这些底物都很贵,而且通过透明圈的大小觉得也不是特别准确。

要是用琼脂糖-纤维平板法需要凝血酶、尿激酶和纤维蛋白原,这几种物质应该从哪里买啊,是不是都很贵啊,一支是不是只能用一次呢?
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6楼2012-07-12 16:56:59
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陈年芬芳

新虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by lhsophia at 2012-07-12 16:56:59
要是用琼脂糖-纤维平板法需要凝血酶、尿激酶和纤维蛋白原,这几种物质应该从哪里买啊,是不是都很贵啊,一支是不是只能用一次呢?...

确实很贵哦,我实验室与企业合作的,他们企业财大,都是一支用一次,不过实验室到很节省,一支会做好多个平板。一支一次成本太大太浪费了。
7楼2012-07-12 18:50:07
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氢化大雪

木虫 (著名写手)

★
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不知道楼主的问题解决掉了没有,还是推荐用琼脂糖-纤维蛋白平板发,我上个月刚做的,不很麻烦
美酒香茗
8楼2012-08-27 20:33:12
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jlcccs

木虫 (正式写手)

★
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我也正在做酶活力检测,顶一下
9楼2012-10-14 07:26:59
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slf888

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:
8楼: Originally posted by 氢化大雪 at 2012-08-27 20:33:12
不知道楼主的问题解决掉了没有,还是推荐用琼脂糖-纤维蛋白平板发,我上个月刚做的,不很麻烦

求具体的操作方法,我邮箱574077255@qq.com   谢谢  急用
10楼2014-08-24 15:06:27
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