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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何解决包涵体复性沉淀问题？
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healy13

禁虫 (小有名气)
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1楼 2012-07-05 10:11:15
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apple-1985

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-05 20:37:58
你可以试试换一种复性方法。或者调整诱导表达条件，牺牲蛋白表达量以求得到可溶性蛋白，再不然就只能换载体，重新构建啦！试试改变透析温度和时间，说的不对不要拍我。当时我是为包涵体纯化花了3个多月时间，加油！其实复性不复性都可以做抗体的。
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4楼2012-07-05 16:10:37
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普通回帖

gelois

金虫 (正式写手)
试试调节下PH？
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2楼2012-07-05 10:41:47
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healy13

禁虫 (小有名气)
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3楼2012-07-05 10:43:04
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healy13

禁虫 (小有名气)
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5楼2012-07-05 16:57:20
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apple-1985

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-08-22 20:08:42
你合成的片段当时注意氨基酸的可溶性了没有啊？我有个同学合成的时候没有注意合成片段的溶解性，结果弄回来就是不溶。
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6楼2012-07-06 09:01:43
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)
我最近也在做包涵体的纯化，也出现和你同样的问题，在请问你的问题解决了没呢，如果解决，能告诉我怎么方法嘛？谢谢
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7楼2012-07-18 16:39:47
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
你好，我想问下，你的问题现在解决了吗？
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8楼2012-08-20 15:57:42
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生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般情况下都会有可溶性表达的，换载体是一个比较不错的方法，不同的载体和标签可能出现不同的结果，要做抗体的话可以先免疫着，能取到10%已经可以了，多纯化点就是累点，这总比换方法摸索要好的多！
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学习，进步
9楼2012-08-21 10:45:04
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bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

复兴过程蛋白沉淀很常见，建议你试试柱上复性，洗脱后可以添加表面活性剂并0.2膜过滤
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10楼2012-08-22 14:29:04
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