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清木ing

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

最后一步的buffer可以加点低浓度的尿素，比如0.2M的

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11楼2012-09-24 10:28:40

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appletree-

新虫 (小有名气)

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您好！我最近要做包涵体蛋白复性，您能把有关蛋白复性的paper发给我吗？感谢！

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12楼2013-05-21 19:30:51

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edoz1986

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【答案】应助回帖

包涵体的形成很多是由于大肠系统无法形成二硫键而产生的。建议去uniprot查一下你的蛋白有没有链内二硫键，如果有的话请尝试用氧化还原体系复性，这个百度就知道的。

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13楼2013-05-22 17:28:57

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edoz1986

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【答案】应助回帖

大肠表达系统无法形成链内二硫键，复性的时候应该先查一下你的蛋白有没有链内二硫键，可以去uniprot查一下，如果有的话就要加入氧化还原体系透析（gsh：gssh），再一个，透析的浓度不要高了，否则极容易聚集沉淀，防止聚集沉淀，500mM精氨酸是不错的，尤其是最后去除尿素的一步。
还有就是，查一下你的蛋白里面的鼓励半管氨酸，如果有的话，建议加入2mmdtt。谢谢

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14楼2013-05-23 09:18:48

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