24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4045  |  回复: 16

清木ing

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最后一步的buffer可以加点低浓度的尿素,比如0.2M的
11楼2012-09-24 10:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletree-

新虫 (小有名气)

您好!我最近要做包涵体蛋白复性,您能把有关蛋白复性的paper发给我吗?感谢!
12楼2013-05-21 19:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

包涵体的形成很多是由于大肠系统无法形成二硫键而产生的。建议去uniprot查一下你的蛋白有没有链内二硫键,如果有的话请尝试用氧化还原体系复性,这个百度就知道的。
13楼2013-05-22 17:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大肠表达系统无法形成链内二硫键,复性的时候应该先查一下你的蛋白有没有链内二硫键,可以去uniprot查一下,如果有的话就要加入氧化还原体系透析(gsh:gssh),再一个,透析的浓度不要高了,否则极容易聚集沉淀,防止聚集沉淀,500mM精氨酸是不错的,尤其是最后去除尿素的一步。
还有就是,查一下你的蛋白里面的鼓励半管氨酸,如果有的话,建议加入2mmdtt。谢谢
14楼2013-05-23 09:18:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

鼓励半管氨酸=孤立半胱氨酸
15楼2013-05-23 09:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以用大分子量的可溶标签啊,比如gst mbp ,以及tf载体的啦,15度过夜摇的啦。
16楼2013-05-24 10:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

高大上小天鹅

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by bioleo at 2012-08-22 14:29:04
复兴过程蛋白沉淀很常见,建议你试试柱上复性,洗脱后可以添加表面活性剂并0.2膜过滤

你好请问柱上复性怎么操作呢?
17楼2015-09-18 14:46:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 healy13 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研二轮调剂 +9 故人?? 2026-04-09 9/450 2026-04-13 09:05 by lhj2009
[考研] 化工学硕 285求调剂 +27 Wisjxn 2026-04-07 27/1350 2026-04-13 08:56 by lhj2009
[考研] 271求调剂 +23 2261744733 2026-04-11 23/1150 2026-04-13 08:48 by 学zh
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 liuchb715 2026-04-09 5/250 2026-04-13 08:46 by 小_小_白虫
[考研] 一志愿安大生物学07初试322、本科二本、调剂求助 +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +7 升格阿达 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:56 by yuyin1233
[考研] 求调剂,985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 13/650 2026-04-12 22:40 by 涵竹刘
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
[考研] 316求调剂 +5 想读研究生( ?∵ 2026-04-07 5/250 2026-04-12 00:43 by 蓝云思雨
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +18 ioodiiij 2026-04-08 18/900 2026-04-11 20:25 by liyun12321
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 调剂 +4 电气300求调剂不 2026-04-08 7/350 2026-04-11 10:44 by 紫曦紫棋
[考研] 283求调剂,工科! +12 苏打水7777 2026-04-08 12/600 2026-04-11 10:28 by 逆水乘风
[考研] 080100力学316求调剂 +8 L_Hairui 2026-04-07 8/400 2026-04-11 10:00 by zhq0425
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[论文投稿] mdpi小修rvr时间四五天了 20+3 哈哈high 2026-04-08 5/250 2026-04-10 16:02 by 北京莱茵润色
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
信息提示
请填处理意见