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梅心情意

银虫 (正式写手)

[求助] Gateway构建载体,终端载体和入门载体pDonor抗性相同,怎么筛选LR的阳性克隆

如题,构建了几个载体,终端载体只有一个kan抗性,和入门载体pDonor抗性一样,LR反应后转化DH5&,通过菌液PCR不能分别出阳性和阴性克隆,测序发现大部分都是pDonor载体的序列,也就是LR反应没发生或者发生的很少,这种情况怎么办?实验进行不下去了,很着急,请求各位前辈指教!不胜感激!
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longage.gene

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把destination vetor的kan换掉,或者加一个别的不就ok了,又不麻烦
2楼2012-06-27 22:37:15
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