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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » southern blot 酶切电泳
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feichen2008

银虫 (小有名气)

[交流] southern blot 酶切电泳 已有1人参与

这是我最近做的 southern blot 酶切电泳图，杂交最后没有带，是什么原因？酶切不完全，还是基因组提的不好？我用的是天根的提细菌基因组试剂盒提的基因组，提出来总是有点拖尾，怎么办？急，求各位虫友帮忙，万分感谢！
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1楼 2012-06-27 10:49:31
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yanshuai511

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知道你做没做加probe的阳性对照，如果你的probe依然杂不出带的话，那就是你体系有问题。如果体系没问题的话，基因组的话10ug的量肯定是够了，不知道你要区分的条带是多大？跑胶的话如果有条件的话可以在冷库跑，这样可以加大点儿电压，跑的时间短点儿。这样条带比较集中。
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2楼2012-06-28 16:23:48
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feichen2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yanshuai511 at 2012-06-27 20:23:48
不知道你做没做加probe的阳性对照，如果你的probe依然杂不出带的话，那就是你体系有问题。如果体系没问题的话，基因组的话10ug的量肯定是够了，不知道你要区分的条带是多大？跑胶的话如果有条件的话可以在冷库跑，这 ...

第二个泳道是质粒，杂交是有带的，说明探针没问题。我区分的条带大小大概有7000到8000bp左右，50微升体系，基因组量为5微克，酶切了大概一天半吧。我想知道，为什么样品杂不出带？很郁闷
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3楼2012-06-28 20:53:54
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