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feichen2008

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[交流] southern blot 酶切电泳已有1人参与

这是我最近做的 southern blot 酶切电泳图，杂交最后没有带，是什么原因？酶切不完全，还是基因组提的不好？我用的是天根的提细菌基因组试剂盒提的基因组，提出来总是有点拖尾，怎么办？急，求各位虫友帮忙，万分感谢！

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1楼 2012-06-27 10:49:31

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feichen2008

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引用回帖:

2楼: Originally posted by yanshuai511 at 2012-06-27 20:23:48
不知道你做没做加probe的阳性对照，如果你的probe依然杂不出带的话，那就是你体系有问题。如果体系没问题的话，基因组的话10ug的量肯定是够了，不知道你要区分的条带是多大？跑胶的话如果有条件的话可以在冷库跑，这 ...

第二个泳道是质粒，杂交是有带的，说明探针没问题。我区分的条带大小大概有7000到8000bp左右，50微升体系，基因组量为5微克，酶切了大概一天半吧。我想知道，为什么样品杂不出带？很郁闷