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草帽小子

银虫 (小有名气)

[求助] 求高手指点一哈SDS-PAGE图

我跑的蛋白!怎么会这样!




是染色不好,还是条带不清晰!
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
草帽小子: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-26 09:38:59
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流经验 2012-06-27 13:37:56
是考染的吧,首先,你的样品太多,可以少点一半的样。其次,从你的marker来看,可能你的跑胶缓冲液使用次数太多了,建议你使用两次以上的直接扔掉。
2楼2012-06-25 14:14:37
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
草帽小子: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-06-26 09:39:24
应该是电泳缓冲液使用此说过多造成的。
3楼2012-06-25 14:33:40
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
草帽小子: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-26 09:39:49
建议减少样品的上样量,缩短染色时间一般新染色液20min即可差一点的染40min,电泳缓冲液用新稀释配制的。
4楼2012-06-25 16:47:18
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windsor2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助,欢迎交流经验 2012-06-27 13:38:20
草帽小子: 回帖置顶 2012-07-05 22:58:23
从你的电泳图来看,主要问题是上样量太多,你可以先上此量的一半,跑出来如果不清楚还可以再稀释再上样,直到跑出来的主次条带都很清楚,这样你看起来也很清楚,而且容易比较。另外,要确保你的电压稳定,这样效果才会好。希望对楼主有帮助。
只要功夫深铁杵磨成针
5楼2012-06-27 09:07:23
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kaka100

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
草帽小子: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢啊! 2012-07-05 22:57:02
样品太多,电压先低后高!
6楼2012-06-29 02:12:42
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燕子9883

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
草帽小子: 金币+4, ★★★很有帮助, 灰常感谢! 2012-07-05 22:56:38
1)重新配胶,保证胶能均匀凝固。
2)电泳缓冲液换新的。
3)样品加入loadingbufer后,加热,离心后,再上样。
7楼2012-07-04 14:47:56
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