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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » MTT试验中，加药孔的吸光值，为什么比空白还大。排除细胞接的不匀因素
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smyoung

新虫 (小有名气)

[交流] MTT试验中，加药孔的吸光值，为什么比空白还大。排除细胞接的不匀因素已有4人参与

最近做了3次MTT实验，结果都很不理想。加药孔的吸光值比空白的还大。和开学初的结果相差太大。哪位高人能帮忙分析一下原因
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1楼2012-06-24 19:28:42
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l_h_10

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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看天: 金币+3, 鼓励交流 2012-10-07 22:14:39
加药孔与空白差异大吗？我自己的经验来说，有时候污染的时候，吸光度就会很大。你看加药孔的细胞了吗，细胞比空白孔多吗？加MTT前，吸掉药物了没？有时候MTT和药物会反应导致吸光度值变大。
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2楼2012-06-24 23:33:56
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by l_h_10 at 2012-06-24 23:33:56
加药孔与空白差异大吗？我自己的经验来说，有时候污染的时候，吸光度就会很大。你看加药孔的细胞了吗，细胞比空白孔多吗？加MTT前，吸掉药物了没？有时候MTT和药物会反应导致吸光度值变大。

镜检可以看见细胞已经死亡，但是测出的值不对。而且没有染菌，细胞分散也很均匀
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3楼2012-06-25 10:12:04
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l_h_10

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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看天: 金币+2, 鼓励回答 2012-10-07 22:15:15
难道是药物与MTT反应了？加MTT前把加药的培养基洗出，再加入MTT。这个差异挺大的。
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4楼2012-06-25 20:59:00
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by l_h_10 at 2012-06-25 20:59:00
难道是药物与MTT反应了？加MTT前把加药的培养基洗出，再加入MTT。这个差异挺大的。

怎么洗呢，用PBS吗？
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5楼2012-06-25 21:42:01
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l_h_10

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-07 22:15:26
我的做法是药物作用够时间后，把加了药物的培养基吸出来，（PBS加进去再吸出来，洗一边也可）把MTT加在新的培养液里加进去。再孵育2-4小时即可。
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6楼2012-06-26 13:04:45
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by l_h_10 at 2012-06-26 13:04:45
我的做法是药物作用够时间后，把加了药物的培养基吸出来，（PBS加进去再吸出来，洗一边也可）把MTT加在新的培养液里加进去。再孵育2-4小时即可。

原来这样啊，真是谢谢啦
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7楼2012-06-27 22:03:11
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zitaoguo

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-10-07 22:15:48
好像测试的药如果还原性强的话，对结果的影响很大的。所以最好在加MTT之前洗一下
，祝你实验成功
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smyoung
Fighting
8楼2012-06-28 16:17:00
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smyoung

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by zitaoguo at 2012-06-28 16:17:00
好像测试的药如果还原性强的话，对结果的影响很大的。所以最好在加MTT之前洗一下
，祝你实验成功

真是谢谢啦
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9楼2012-06-30 10:51:39
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静天之蓝

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-10-07 22:16:00
必须是pba洗 2到3遍 然后吸出洗涤液 然后加dmso 酶标测
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10楼2012-10-07 09:39:48
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