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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » MTT试验中，加药孔的吸光值，为什么比空白还大。排除细胞接的不匀因素
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smyoung

新虫 (小有名气)

[交流] MTT试验中，加药孔的吸光值，为什么比空白还大。排除细胞接的不匀因素已有4人参与

最近做了3次MTT实验，结果都很不理想。加药孔的吸光值比空白的还大。和开学初的结果相差太大。哪位高人能帮忙分析一下原因
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1楼2012-06-24 19:28:42
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l_h_10

金虫 (小有名气)
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看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-07 22:15:26
我的做法是药物作用够时间后，把加了药物的培养基吸出来，（PBS加进去再吸出来，洗一边也可）把MTT加在新的培养液里加进去。再孵育2-4小时即可。
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6楼2012-06-26 13:04:45
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l_h_10

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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看天: 金币+3, 鼓励交流 2012-10-07 22:14:39
加药孔与空白差异大吗？我自己的经验来说，有时候污染的时候，吸光度就会很大。你看加药孔的细胞了吗，细胞比空白孔多吗？加MTT前，吸掉药物了没？有时候MTT和药物会反应导致吸光度值变大。
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2楼2012-06-24 23:33:56
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by l_h_10 at 2012-06-24 23:33:56
加药孔与空白差异大吗？我自己的经验来说，有时候污染的时候，吸光度就会很大。你看加药孔的细胞了吗，细胞比空白孔多吗？加MTT前，吸掉药物了没？有时候MTT和药物会反应导致吸光度值变大。

镜检可以看见细胞已经死亡，但是测出的值不对。而且没有染菌，细胞分散也很均匀
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3楼2012-06-25 10:12:04
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l_h_10

金虫 (小有名气)
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看天: 金币+2, 鼓励回答 2012-10-07 22:15:15
难道是药物与MTT反应了？加MTT前把加药的培养基洗出，再加入MTT。这个差异挺大的。
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4楼2012-06-25 20:59:00
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