应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 关于枯草芽孢杆菌转化的问题~
51/1返回列表
查看: 3497  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

爱莫若月

木虫 (小有名气)

[交流] 关于枯草芽孢杆菌转化的问题~

我近期做了枯草芽孢杆菌的电转化，用的载体在大肠杆菌表现氨苄抗性（100ug/ml），在枯草芽孢杆菌是红霉素（0.3ug/ml）抗性。转化后涂平板的时候弄错了抗性，加了氨苄进去，第二天居然也长了菌落出来，不解，这是其一；加红霉素的也长了很多菌落，我挑了氨苄平板上的菌落做菌落PCR，没有转化的没P出来，质粒以及转化的都有条带，然后我又提没转化的枯草芽孢杆菌和转化的菌的质粒，再P，发现转化的可以P出来我的目的条带，这是正常的，但是没转化的也P出来条带了，搞不懂为什么？有没有人可以解答一下啊？

[ Last edited by 爱莫若月 on 2012-6-21 at 10:50 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-20 18:11:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiyun2006

铁虫 (小有名气)
★
爱莫若月(金币+1): 谢谢参与
你用的是什么质粒啊？是将质粒直接从大肠杆菌里提出来后，直接转芽孢杆菌吗？
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-11 10:54:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
★
爱莫若月(金币+1): 谢谢参与
。。我不知道我理解不行还是你叙述的太迷糊。 后面怎么来了个没有转化的 是什么。能不能描述的再清楚些。

氨苄平板和红霉素平板都长了，注意下抗生素的使用方法是不是正确。

另外我想问下你转化的枯草芽孢杆菌的 具体电击条件，转化的质粒是什么质粒。质粒全长有多少。。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-21 09:23:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱莫若月

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 老夏853 at 2012-06-21 09:23:02
。。我不知道我理解不行还是你叙述的太迷糊。 后面怎么来了个没有转化的 是什么。能不能描述的再清楚些。

氨苄平板和红霉素平板都长了，注意下抗生素的使用方法是不是正确。

另外我想问下你转化的枯草芽孢杆菌 ...

没转化质粒的枯草芽孢杆菌，作为阴性对照~抗生素我就是配好加进去的呀~红霉素的浓度太低了，我都不知道起不起作用啊~点击条件是2kv，1mm，电击常数是4.0~4.5
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-21 10:52:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱莫若月 at 2012-06-21 10:52:46
没转化质粒的枯草芽孢杆菌，作为阴性对照~抗生素我就是配好加进去的呀~红霉素的浓度太低了，我都不知道起不起作用啊~点击条件是2kv，1mm，电击常数是4.0~4.5...

我也在做枯草芽孢杆菌的电击转化，能否共享下你的实验方法。包括点转培养基什么的，详细指点下 可以不 ？
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-21 11:03:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭