24小时热门版块排行榜    

查看: 2997  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

欧朵拉

铁虫 (小有名气)

[交流] 求解:实时荧光定量PCR奇峰 已有8人参与

求高人指点,最近在做定量PCR,阳性扩增曲线很好,可是阴性也有峰型。阴性Ct值在36以上,而且阳性和阴性Ct值相差很大,这样的结果怎么判定?
重复了好几次,阴性都是在36以后起峰,引物、模板都换了,依然是这个结果···
回复此楼
做自己喜欢的事情,心态决定一切~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-06-22 16:50:49
可以忽略不计,PCR是很敏感的,有时候你就是用水,也会跑出曲线来。但出现这种情况的原因很难解释。如果楼主用内参的引物做NTC,结果很可能跑出曲线来,但是由于CT值相差很大,所以不影响定量的,楼主可放心

弱弱的问句,啥叫NTC,为啥要做一组NTC实验
19楼2015-07-30 16:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

l_h_10

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-20 15:34:56
你的阴性是没加什么?如果是加了引物,没加模版的话,有可能是引物污染了。(引物是在超净工作台里稀释的吗?)还有你用的是什么的试剂盒?如果是takara的试剂盒的话,也没有关系了,他们试剂盒的本底值比较高,我们也出现过这个问题,就咨询过技术员,takara的技术员说只要在35个循环之后出峰是没有问题的。
2楼2012-06-20 09:40:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiayongxiu

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-20 15:35:05
水也很重要,看看你的水是否有问题。还有就是你的阳性的溶解曲线如何?是单峰还是双峰?如果阳性没有任何问题,而NTC有扩增也是可以的,只要其ct值在35个循环之后。
一切都要靠自己努力
3楼2012-06-20 11:24:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoyonggang

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我记得阴性阳性ct差7以上就可以忽略了,你的达到这个标准了吗?达到了就不要太纠结于阴性的峰了
4楼2012-06-20 12:44:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见