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pingkaihe

金虫 (正式写手)

费简树森

[求助] SDS-PAGE问题

近来跑SDS-PAGE，老是出现横向扩散，样品是细菌膜蛋白，用50mM Tris-HCl溶解，在-20度冰箱保存一年半。体系换了多次，都是如此，而其他蛋白样品不会出现横向扩散。不知哪位虫友有没有出现这种情况，望不吝指教。结果如图。
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1楼 2012-06-16 10:14:29
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pingkaihe

金虫 (正式写手)

费简树森
非常感谢二楼，但是确实都没有我要找的问题，我的部分蛋白条带极度扩散到整个胶面。采取了很多措施，问题依然。
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2楼2012-06-17 13:02:56
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qingheyouyou
3楼2012-06-17 13:19:33
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mudanzhiai

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

甘油没混匀，应当把样品和上样缓冲液再一次混合，再一次煮沸10min
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生活工作没有一帆风顺，坎坎坷坷才是真实
4楼2012-08-14 13:58:09
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自然_法则

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Tris Cl 应该是没问题的  体系确定没问题吗  我最近跑了几次SDS 没有出现过这种情况 用的垂直电泳槽  可能是上样的问题吧  你用薄梳子试试上满样品
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每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
5楼2012-08-24 09:12:54
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幻流心魇

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用磷酸盐体系试试吧！样品煮沸10MIN，再离心一下。
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6楼2012-10-07 12:18:22
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pingkaihe

金虫 (正式写手)

费简树森
引用回帖:
6楼: Originally posted by 幻流心魇 at 2012-10-07 12:18:22
用磷酸盐体系试试吧！样品煮沸10MIN，再离心一下。

问题已经解决，谢谢。
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7楼2012-10-07 14:55:14
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