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lhazrael

木虫 (正式写手)

麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没做过,可能问得有点弱,请高手帮忙
11楼2012-06-16 19:14:06
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lhazrael: 金币+1, 有帮助, 没有解决问题,还是谢谢啦 2012-06-17 14:19:15
对于菌丝会浮起来的问题,很难解决。但是你说变形的话,倒不像你说的那样,戊二醛既然是固定剂,就是为了保持菌体的形态不发生大的变化。我做过细菌的固定,戊二醛和锇酸是固定剂,而后面用乙醇梯度脱水后再用乙酸异戊酯置换,形态会好些。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
12楼2012-06-17 09:58:38
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-16 19:14:06
麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没 ...

这个问题又没人帮忙解答下呢?
13楼2012-06-17 13:33:34
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zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


lhazrael: 金币+1, 有帮助, 问的是真菌... 2012-06-17 14:18:14
盖玻片上最好覆一层Formar 膜,或者简单一点镀一层很薄的金箔,这样细胞或细菌容易附着,在后续的处理中不易脱落。把浓度适中的用培养液悬浮吹散的细菌滴在该薄片中央,注意不能散开到盖玻片边缘,使细菌自然沉降0.5~1小时,然后再缓慢从容器边缘加入戊二醛固定液至淹没盖玻片,固定半小时后进行后续处理即可。
14楼2012-06-17 13:55:52
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lhazrael

木虫 (正式写手)

麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没做过,可能问得有点弱,请高手帮忙
15楼2012-06-17 14:15:05
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zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lhazrael: 金币+2, 有帮助, 谢谢啦 2012-06-18 17:32:06
引用回帖:
15楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-17 14:15:05
麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没 ...

扫描电镜主要是观察物体的表面的,只要你的观察对象暴露在表面,就可以观察。只要把有细菌的那一面暴露出来就行。
16楼2012-06-18 08:44:44
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lhazrael

木虫 (正式写手)

想在问一下,我扫描电镜制的片,乙醇脱水后没有置换,直接真空干燥了,可以处理下再包埋做透射电镜制片吗?
17楼2012-06-28 16:28:29
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-28 16:28:29
想在问一下,我扫描电镜制的片,乙醇脱水后没有置换,直接真空干燥了,可以处理下再包埋做透射电镜制片吗?

求助高手
18楼2012-06-29 16:26:28
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-06-16 02:57:41
可以使用固体培养基培养,盖玻片插片法制片子.

我准备试一下盖玻片插片,想问下具体怎么操作?非常感谢
19楼2012-07-11 09:58:51
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by lhazrael at 2012-07-11 09:58:51
我准备试一下盖玻片插片,想问下具体怎么操作?非常感谢...

是将菌液涂完平板后直接插上盖玻片还是等长出菌落再插上呢?能否具体描述下操作方法呢?
20楼2012-07-11 10:05:13
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