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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 液体培养丝状真菌扫描电镜制片
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lhazrael

木虫 (正式写手)
麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
以前没做过，可能问得有点弱，请高手帮忙
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11楼2012-06-16 19:14:06
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lhazrael: 金币+1, ★有帮助, 没有解决问题，还是谢谢啦 2012-06-17 14:19:15
对于菌丝会浮起来的问题，很难解决。但是你说变形的话，倒不像你说的那样，戊二醛既然是固定剂，就是为了保持菌体的形态不发生大的变化。我做过细菌的固定，戊二醛和锇酸是固定剂，而后面用乙醇梯度脱水后再用乙酸异戊酯置换，形态会好些。
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
12楼2012-06-17 09:58:38
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lhazrael

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-16 19:14:06
麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
以前没 ...

这个问题又没人帮忙解答下呢？
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13楼2012-06-17 13:33:34
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zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
lhazrael: 金币+1, ★有帮助, 问的是真菌... 2012-06-17 14:18:14
盖玻片上最好覆一层Formar 膜，或者简单一点镀一层很薄的金箔，这样细胞或细菌容易附着，在后续的处理中不易脱落。把浓度适中的用培养液悬浮吹散的细菌滴在该薄片中央，注意不能散开到盖玻片边缘，使细菌自然沉降0.5～1小时，然后再缓慢从容器边缘加入戊二醛固定液至淹没盖玻片，固定半小时后进行后续处理即可。
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14楼2012-06-17 13:55:52
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lhazrael

木虫 (正式写手)
麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
以前没做过，可能问得有点弱，请高手帮忙
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15楼2012-06-17 14:15:05
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zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lhazrael: 金币+2, ★有帮助, 谢谢啦 2012-06-18 17:32:06
引用回帖:
15楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-17 14:15:05
麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
以前没 ...

扫描电镜主要是观察物体的表面的，只要你的观察对象暴露在表面，就可以观察。只要把有细菌的那一面暴露出来就行。
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16楼2012-06-18 08:44:44
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lhazrael

木虫 (正式写手)
想在问一下，我扫描电镜制的片，乙醇脱水后没有置换，直接真空干燥了，可以处理下再包埋做透射电镜制片吗？
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17楼2012-06-28 16:28:29
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lhazrael

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-28 16:28:29
想在问一下，我扫描电镜制的片，乙醇脱水后没有置换，直接真空干燥了，可以处理下再包埋做透射电镜制片吗？

求助高手
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18楼2012-06-29 16:26:28
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lhazrael

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-06-16 02:57:41
可以使用固体培养基培养，盖玻片插片法制片子.

我准备试一下盖玻片插片，想问下具体怎么操作？非常感谢
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19楼2012-07-11 09:58:51
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lhazrael

木虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by lhazrael at 2012-07-11 09:58:51
我准备试一下盖玻片插片，想问下具体怎么操作？非常感谢...

是将菌液涂完平板后直接插上盖玻片还是等长出菌落再插上呢？能否具体描述下操作方法呢？
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20楼2012-07-11 10:05:13
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