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lhazrael

木虫 (正式写手)

[求助] 液体培养丝状真菌扫描电镜制片

我想做一下液体培养丝状真菌的扫描电镜。
     实验室的人都是做细菌的,他们是把菌液滴在盖玻片上,等菌液干后加戊二醛固定,然后漂洗,梯度脱水再干燥。我按照他们的方法固定后漂洗的时候菌丝老是浮起来洗丢掉。而且再盖玻片上操作也比较麻烦。想用离心的方法,就是加试剂处理后离心,可是菌丝根本离不下来,14000转都不行,想问一下各位高手:
    怎样固定住才能使加液体时菌丝不再飘起来?
    干燥后再加戊二醛固定菌不就失水变形了吗?
    漂洗的时候用水还是缓冲液呢?用水的话菌丝应该很容易变形吧?怎样尽量保持菌的形态不变?

[ Last edited by lhazrael on 2012-6-14 at 12:32 ]
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lhazrael

木虫 (正式写手)

急啊,高手帮忙啊
2楼2012-06-14 14:52:54
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lhazrael

木虫 (正式写手)

我是要做电镜,振荡培养
4楼2012-06-14 15:05:49
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lhazrael

木虫 (正式写手)

谢谢,是必须要用电镜,因为要观察细胞壁
7楼2012-06-15 21:37:48
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-06-16 02:57:41
可以使用固体培养基培养,盖玻片插片法制片子.

呃...我讲过了,是想看液体培养基里的菌丝,谢谢
9楼2012-06-16 08:49:06
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lhazrael

木虫 (正式写手)

麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没做过,可能问得有点弱,请高手帮忙
11楼2012-06-16 19:14:06
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-16 19:14:06
麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没 ...

这个问题又没人帮忙解答下呢?
13楼2012-06-17 13:33:34
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lhazrael

木虫 (正式写手)

麻烦再问一下,我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的:从菌落上切琼脂块薄片,然后固定脱水等等。我做完干燥之后,发现薄片不再是平的,变卷曲了,想问下还能用吗?扫描电镜的样品是否必须是平的?
以前没做过,可能问得有点弱,请高手帮忙
15楼2012-06-17 14:15:05
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lhazrael

木虫 (正式写手)

想在问一下,我扫描电镜制的片,乙醇脱水后没有置换,直接真空干燥了,可以处理下再包埋做透射电镜制片吗?
17楼2012-06-28 16:28:29
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lhazrael

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-28 16:28:29
想在问一下,我扫描电镜制的片,乙醇脱水后没有置换,直接真空干燥了,可以处理下再包埋做透射电镜制片吗?

求助高手
18楼2012-06-29 16:26:28
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