24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2394  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lhazrael

木虫 (正式写手)

[求助] 液体培养丝状真菌扫描电镜制片

我想做一下液体培养丝状真菌的扫描电镜。
     实验室的人都是做细菌的,他们是把菌液滴在盖玻片上,等菌液干后加戊二醛固定,然后漂洗,梯度脱水再干燥。我按照他们的方法固定后漂洗的时候菌丝老是浮起来洗丢掉。而且再盖玻片上操作也比较麻烦。想用离心的方法,就是加试剂处理后离心,可是菌丝根本离不下来,14000转都不行,想问一下各位高手:
    怎样固定住才能使加液体时菌丝不再飘起来?
    干燥后再加戊二醛固定菌不就失水变形了吗?
    漂洗的时候用水还是缓冲液呢?用水的话菌丝应该很容易变形吧?怎样尽量保持菌的形态不变?

[ Last edited by lhazrael on 2012-6-14 at 12:32 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lhazrael: 金币+1, 有帮助, 没有解决问题,还是谢谢啦 2012-06-17 14:19:15
对于菌丝会浮起来的问题,很难解决。但是你说变形的话,倒不像你说的那样,戊二醛既然是固定剂,就是为了保持菌体的形态不发生大的变化。我做过细菌的固定,戊二醛和锇酸是固定剂,而后面用乙醇梯度脱水后再用乙酸异戊酯置换,形态会好些。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
12楼2012-06-17 09:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

lhazrael

木虫 (正式写手)

急啊,高手帮忙啊
2楼2012-06-14 14:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱文字

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
真菌需要用乳酸棉兰染色,显微照相才能看的清楚。不知道你的真菌是在固体培养基上培养的,还是震荡培养的?
3楼2012-06-14 15:05:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhazrael

木虫 (正式写手)

我是要做电镜,振荡培养
4楼2012-06-14 15:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见