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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 液体培养丝状真菌扫描电镜制片
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lhazrael

木虫 (正式写手)

[求助] 液体培养丝状真菌扫描电镜制片

我想做一下液体培养后丝状真菌的扫描电镜。
     实验室的人都是做细菌的，他们是把菌液滴在盖玻片上，等菌液干后加戊二醛固定，然后漂洗，梯度脱水再干燥。我按照他们的方法固定后漂洗的时候菌丝老是浮起来洗丢掉。而且再盖玻片上操作也比较麻烦。想用离心的方法，就是加试剂处理后离心，可是菌丝根本离不下来，14000转都不行，想问一下各位高手：
    怎样固定住才能使加液体时菌丝不再飘起来？
    干燥后再加戊二醛固定菌不就失水变形了吗？
    漂洗的时候用水还是缓冲液呢？用水的话菌丝应该很容易变形吧？怎样尽量保持菌的形态不变？

[ Last edited by lhazrael on 2012-6-14 at 12:32 ]
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1楼 2012-06-14 12:23:46
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zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lhazrael: 金币+2, ★有帮助, 谢谢啦 2012-06-18 17:32:06
引用回帖:
15楼: Originally posted by lhazrael at 2012-06-17 14:15:05
麻烦再问一下，我同时也做了固体平板上的电镜制片。按文献讲的：从菌落上切琼脂块薄片，然后固定脱水等等。我做完干燥之后，发现薄片不再是平的，变卷曲了，想问下还能用吗？扫描电镜的样品是否必须是平的？
以前没 ...

扫描电镜主要是观察物体的表面的，只要你的观察对象暴露在表面，就可以观察。只要把有细菌的那一面暴露出来就行。
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16楼2012-06-18 08:44:44
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lhazrael

木虫 (正式写手)
急啊，高手帮忙啊
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2楼2012-06-14 14:52:54
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我爱文字

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
真菌需要用乳酸棉兰染色，显微照相才能看的清楚。不知道你的真菌是在固体培养基上培养的，还是震荡培养的？
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3楼2012-06-14 15:05:00
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lhazrael

木虫 (正式写手)
我是要做电镜，振荡培养
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4楼2012-06-14 15:05:49
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