24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hathaway_

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 216.5
帖子: 3
在线: 7小时
虫号: 1265959
注册: 2011-04-15
性别: MM
专业: 消化系统疾病其他科学问题

[求助] RNA条带总是有杂带

别人跑的DNA都是仅有拖尾，而我的有两个问题！
1，是在目的条带前面总会有一片杂背景，应该是是小分子的DNA，各位大侠，请教一下，是不是因为我做的是组织，所以没有别人的细胞什么的那么纯粹，总有其他物质干扰？？？？？
2，目的条带不是很直，如图中间总是有点小尾巴，是为什么？有人说是加样时候的问题，可我改进加样后（尽量抬高一点加样，以免枪头损伤了胶孔），还是有一点问题！请教各位！！！

回复此楼

» 猜你喜欢

SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有198人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

多多交流

1楼 2012-06-12 22:54:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hathaway_

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 216.5
帖子: 3
在线: 7小时
虫号: 1265959
注册: 2011-04-15
性别: MM
专业: 消化系统疾病其他科学问题

引用回帖:

2楼: Originally posted by longrna at 2012-06-13 09:25:44
标题是RNA，里面内容又冒个DNA提取出来...究竟是？
你用什么方法提的？有详细的操作或试剂使用别人才能跟你分析结果啊。

题目笔误呵呵，我用trizol提的RNA,然后反转录成DNA，然后跑条带！
提取过程应该没问题，就是扩增这个体系需要优化，我又跑了梯度PCR，找寻最佳反应体系，试了57，59，60，61，63五个退火温度，试了两个引物浓度，20umol和10umol！
自我感觉60的退火温度目的条带更好一些，而10umol的引物浓度比20的更好些，但还是在100bp的位置靠下面还是有尾巴，请问我还需要再试更低的引物浓度吗？有人说是因为引物浓度过大引起下面的小片段处出现的尾巴！我刚开始做，经验不足，希望高手给分析下可能有的问题！！！