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木虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE电泳

最近一直在做SDS-PAGE电泳实验,可是每次跑出来的条带都会有竖的条带出现,细胞破碎之后10000rpm/min离心30min,取上清加上样缓冲液开水煮沸10min,再离心20多分钟还是会出现纹理现象,不知道是什么原因?
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  • 2012-06-06 17:26:40, 1.83 M

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木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by vetzcm at 2012-06-06 18:31:01
应该是细胞样品没破坏核酸的原因吧  试着超声破碎处理下细胞 再离心,煮样试试  配胶时凝胶时间要充分

我们实验室就是用超声破碎后离心的。
5楼2012-06-06 18:43:36
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木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangbin1 at 2012-06-06 17:46:21
应该是蛋白胶的原因吧。不应该是蛋白处理上的问题。跑个标准样品试试,像BSA

我加了Marker,没有出现纹理现象,不过胶越往下面,则marker跑的不平。
6楼2012-06-06 18:45:29
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