应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 就要被免疫荧光折磨疯了，大侠啊，求救啊！！！
51/1返回列表
查看: 5162  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

shwkx1987

新虫 (小有名气)

[交流] 就要被免疫荧光折磨疯了，大侠啊，求救啊！！！

从上学期开始做间接免疫荧光，染得是细胞角蛋白骨架。刚开始荧光太弱，摸索了好一阵子，这学期初终于能染好了。可从四月中开始，固定这一步出现了致命的问题，至今找不到好的解决办法。不知有没有有经验的同学可以指点一下啊
  我之前一直用的是-20度遇冷的100%甲醇在-20度固定十分钟，效果还好。可现在固定五分钟细胞就都收缩甚至直接就脱片了，实在不知道为何啊。用4%甲醛、多聚甲醛固定细胞都不会收缩，但严重影响抗体的结合，荧光极弱。
    现在是实验的关键阶段，出现这样的问题，就如晴天霹雳，这段时间快痛苦死了。求救啊！！！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

免疫实验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-05-29 21:37:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shwkx1987

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-05-30 11:12:07
是不是细胞状态不好啊，先把细胞状态调整好再说吧~

我也想到了，复苏了新的还是一样
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-30 12:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

肖颖2009

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是细胞状态不好啊，先把细胞状态调整好再说吧~
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-30 11:12:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

废哥117

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你试一下用4%多聚甲醛固定然后再用甲醇固定
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-30 13:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yushenye

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
“用4%甲醛、多聚甲醛固定细胞都不会收缩，但严重影响抗体的结合，荧光极弱。”
应该是你没有透化好吧
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-30 16:28:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭