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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 就要被免疫荧光折磨疯了，大侠啊，求救啊！！！
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shwkx1987

新虫 (小有名气)

[交流] 就要被免疫荧光折磨疯了，大侠啊，求救啊！！！

从上学期开始做间接免疫荧光，染得是细胞角蛋白骨架。刚开始荧光太弱，摸索了好一阵子，这学期初终于能染好了。可从四月中开始，固定这一步出现了致命的问题，至今找不到好的解决办法。不知有没有有经验的同学可以指点一下啊
  我之前一直用的是-20度遇冷的100%甲醇在-20度固定十分钟，效果还好。可现在固定五分钟细胞就都收缩甚至直接就脱片了，实在不知道为何啊。用4%甲醛、多聚甲醛固定细胞都不会收缩，但严重影响抗体的结合，荧光极弱。
    现在是实验的关键阶段，出现这样的问题，就如晴天霹雳，这段时间快痛苦死了。求救啊！！！！
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1楼 2012-05-29 21:37:52
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yushenye

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
“用4%甲醛、多聚甲醛固定细胞都不会收缩，但严重影响抗体的结合，荧光极弱。”
应该是你没有透化好吧
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8楼2012-05-30 16:28:29
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