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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pcr电泳 加样孔很亮，条带不亮
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zqf523

新虫 (小有名气)

[求助] pcr电泳 加样孔很亮，条带不亮

一共是19个样，为什么没有加样的孔也很亮呢？样是从第2个孔开始加的
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1楼 2012-05-28 16:16:08
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意二楼，应该是模板里面存在较多的蛋白残留。不知道楼主酶加多少，软过太多也可能会出现这种情况。
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6楼2012-05-29 08:27:38
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zqf523: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢，染胶的溶液确实挺久了 2012-05-29 21:03:41
说明你的染胶溶液比较脏了...换下溶液会好些...
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2楼2012-05-28 18:20:47
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jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-28 20:29:27
1.加样孔亮说明，样品有蛋白质等杂质污染。
2.不知道你的模版是什么？基因组，cDNA还是其他的。可能和引物的特异性，退火温度，以及你的循环数有关。
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3楼2012-05-28 18:44:24
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王庭

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-28 20:29:32
这上面没有上样的孔也是亮的，应该不是样品的问题。估计是配胶的试剂出了问题，缓冲液的问题吧或者是琼脂糖、EB等的问题，逐个排查下喽~
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努力做最好的自己！！
4楼2012-05-28 19:02:17
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