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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC出的图很奇怪，希望高人指点
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lavender_li

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC出的图很奇怪，希望高人指点

最近在做HPLC，但是基线偏移的情况遇到好多次。想请教各位高人，遇到这种情况是什么原因？应该怎么办才好？
一起做实验的朋友说也遇到过这种情况，当时问老师，说可能是有脏东西，静置了一阵子就大概好了。但是静置几个小时之后，画出来的线也不是那么漂亮的直线，而且在此加入样品的时候，基线还是偏了。
传上来了两张图上来，这到底怎么回事？希望高人指点
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1楼 2012-05-28 11:35:43
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xf000936

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-05-28 13:33:46
1、如果是等度，可能是柱子或系统脏了，系统可以用IPA冲洗，柱子按说明书冲洗；
2、如果是梯度，上漂的话是有机相问题，下漂水相问题；当然柱子脏也有可能，替换检查就能查出来
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忙啊~~~~
2楼2012-05-28 12:05:40
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢参与~ 欢迎常来分析版~ ^^ 2012-05-28 13:33:56
基线向上飘移表明系统中有污染。请冲洗色谱柱，净化样品，然后使用新溶剂。 向下飘移通常是由于检测室或柱箱中的温度波动的原因。减小室温变化。向下飘移也可能由于溶剂的纯度不是 HPLC 级别的溶剂而且此纯度低的溶剂在紫外有吸收。
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红颜远，相思苦，几番意，难相付。十年情思百年渡，不斩相思不忍顾！
3楼2012-05-28 12:48:28
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394768483

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还有一种可能就是灯的能量不足了...
我们以前就遇到过介个问题，后来经过检测，发现灯能量不足，换了个新的就好了
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4楼2012-05-28 14:29:34
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zhuqiang922

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先进一针空白溶剂，如果空白溶剂色谱图也是那样，把流动相中添加剂去掉，再跑一针空白，看看是不是添加剂的问题，如果不是添加剂的问题，用异丙醇冲检测池。
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6楼2012-05-28 19:58:50
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普通回帖

32862500

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lavender_li: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢。下次尽量详细说清楚 2012-05-29 09:26:52
帮你总结一下，你的问题是：想问一下各位达人基线漂移是什么原因引起的（附谱图）

个人建议：下次问问题请您把您的具体情况说清楚（仪器型号，流动相类型，比例，色谱条件，以及发生这样的问题之前仪器是否正常或者仪器做过什么维护之类的信息）总之信息越详细，各位达人才能更好的帮您分析问原因。

根据您的描述，你这个基线是跳跃式波动的，梯田型——很有可能是光能量的问题。看看灯能量是否太低，如太低更换灯。
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5楼2012-05-28 15:22:55
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lavender_li

银虫 (小有名气)
谢谢大家的帮忙。我去跟教授商量一下，看看怎么办
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7楼2012-05-29 09:28:04
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lavender_li

银虫 (小有名气)
还有关于实验条件的问题，稍微说明一下。
用的是岛津的仪器，柱是150*4.6mmLUNA 5μC18。但是据说时间挺久的了，里面又脏东西混进去，或者灯能量不足是很可能的事情。
移动相是按照100ml 10mM ammonium acetate+50ml水+850ml methanol 的方法配置的。检测波长325nm
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8楼2012-05-29 09:39:36
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zjtxlq2005

新虫 (正式写手)
根据你的条件和图谱，一般就两原因：柱子被污染或者灯老化了，你可以先检查灯能量，不行就再生柱子。
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9楼2013-01-25 09:40:52
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hr.wu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhuqiang922 at 2012-05-28 19:58:50
先进一针空白溶剂，如果空白溶剂色谱图也是那样，把流动相中添加剂去掉，再跑一针空白，看看是不是添加剂的问题，如果不是添加剂的问题，用异丙醇冲检测池。

先走空白是正解。
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10楼2015-02-03 22:15:31
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