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lavender_li

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC出的图很奇怪,希望高人指点

最近在做HPLC,但是基线偏移的情况遇到好多次。想请教各位高人,遇到这种情况是什么原因?应该怎么办才好?
一起做实验的朋友说也遇到过这种情况,当时问老师,说可能是有脏东西,静置了一阵子就大概好了。但是静置几个小时之后,画出来的线也不是那么漂亮的直线,而且在此加入样品的时候,基线还是偏了。
传上来了两张图上来,这到底怎么回事?希望高人指点



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lavender_li

银虫 (小有名气)

还有关于实验条件的问题,稍微说明一下。
用的是岛津的仪器,柱是150*4.6mmLUNA 5μC18。但是据说时间挺久的了,里面又脏东西混进去,或者灯能量不足是很可能的事情。
移动相是按照100ml 10mM ammonium acetate+50ml水+850ml methanol 的方法配置的。检测波长325nm
8楼2012-05-29 09:39:36
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xf000936

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-05-28 13:33:46
1、如果是等度,可能是柱子或系统脏了,系统可以用IPA冲洗,柱子按说明书冲洗;
2、如果是梯度,上漂的话是有机相问题,下漂水相问题;当然柱子脏也有可能,替换检查就能查出来
忙啊~~~~
2楼2012-05-28 12:05:40
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢参与~ 欢迎常来分析版~ ^^ 2012-05-28 13:33:56
基线向上飘移表明系统中有污染。请冲洗色谱柱,净化样品,然后使用新溶剂。 向下飘移通常是由于检测室或柱箱中的温度波动的原因。减小室温变化。向下飘移也可能由于溶剂的纯度不是 HPLC 级别的溶剂而且此纯度低的溶剂在紫外有吸收。
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
3楼2012-05-28 12:48:28
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394768483

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还有一种可能就是灯的能量不足了...
我们以前就遇到过介个问题,后来经过检测,发现灯能量不足,换了个新的就好了
4楼2012-05-28 14:29:34
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