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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

[交流] WB经常少条带 已有9人参与

WB 做了好几次,经常出现少一两个条带的现象。样品应该没问题,因为上上次的时候几个条带都出来了,虽然太弱。
刚才曝光,4个样,出来2个条带,为什么啊为什么?
之前5个样,居然也只出来了3个条带,少2个。
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一步一步

木虫 (著名写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的marker曝光情况怎么样啊??
2楼2012-05-28 11:11:02
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晴天1882

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 一步一步 at 2012-05-28 11:11:02
你的marker曝光情况怎么样啊??

marker能曝光出来吗?
人有绝交,才有至交!
3楼2012-05-28 11:31:03
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晴天1882

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-29 02:04:21
会不会是转膜那里出问题了?或是孵育抗体的时候有气泡,和目的蛋白没结合好,
人有绝交,才有至交!
4楼2012-05-28 11:33:46
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lxfbsh2003

金虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也常遇到此类问题,很是奇怪。还有时候会出项假阳性的情况。
5楼2012-05-28 12:47:21
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 一步一步 at 2012-05-28 11:11:02
你的marker曝光情况怎么样啊??

我用的MARER是预染的,只能标记分子量,不能曝光。
6楼2012-05-28 16:20:45
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晴天1882 at 2012-05-28 11:33:46
会不会是转膜那里出问题了?或是孵育抗体的时候有气泡,和目的蛋白没结合好,

我昨天曝光的时候,两头的条带出来了,中间的条带没出来,应该不会是转膜的问题。
我抗体4度孵育了18个小时以上,即使有少量气泡,也不会差别这么大吧。
7楼2012-05-28 16:23:39
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lxfbsh2003 at 2012-05-28 12:47:21
我也常遇到此类问题,很是奇怪。还有时候会出项假阳性的情况。

来 ·抱头痛哭下·
8楼2012-05-28 16:24:11
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晴天1882

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+3, 鼓励分享和交流 2012-05-29 02:04:38
引用回帖:
7楼: Originally posted by gigiloveu at 2012-05-28 16:23:39
我昨天曝光的时候,两头的条带出来了,中间的条带没出来,应该不会是转膜的问题。
我抗体4度孵育了18个小时以上,即使有少量气泡,也不会差别这么大吧。...

转膜湿转的各层之间有气泡的话,又刚好在你目的蛋白的地方,有可能就转不过去,抗体孵育应该没问题,不然就是你最初提取蛋白的时候出问题了。不知道的做法,具体的也不好分析。
人有绝交,才有至交!
9楼2012-05-28 21:42:20
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 晴天1882 at 2012-05-28 21:42:20
转膜湿转的各层之间有气泡的话,又刚好在你目的蛋白的地方,有可能就转不过去,抗体孵育应该没问题,不然就是你最初提取蛋白的时候出问题了。不知道的做法,具体的也不好分析。...

气泡这问题还真得仔细考虑下了, 今天又跑了两块胶,现在正在转膜中,看明天能曝光情况了。
3Q
10楼2012-05-28 21:57:20
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