应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取表征
51/1返回列表
查看: 1022  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

821078607

银虫 (小有名气)

[交流] RNA提取表征

请教大家，我从细胞中提取出来的总RNA加入不同量的水进行稀释OD260/OD280会发生变化从2.1（稀释四十倍）变成了1.7（稀释八十倍），那么要怎样确定水量，还有我提取的RNA能不能用呢
具体电泳表征该怎么做啊？我做了几次都没成功，大家都用什么染料，EB吗？电泳电压一般多少V，跑多长时间呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-05-23 22:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈朵朵

银虫 (初入文坛)
★
821078607(金币+1): 谢谢参与
我用的染料是Gelred  加的量是30ml 1.0%的琼脂糖凝胶加0.8ul。用EB也可以。电压200v 15min就可以，因为电压大跑得快，RNA降解的几率就小~
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-24 13:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

gjs713

至尊木虫 (职业作家)
★
821078607(金币+1): 谢谢参与
你用的是eppendorf的那个微量核酸定量仪测定的吧。误差很大的。你可以试试看，应该也能用的。
电泳用100V跑30-40min就行了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-23 22:19:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
821078607(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-24 13:52:12
RNA能不能用这个问题还真难回答，你没有电泳图，不知道有没有降解。
电泳怎么跑，要看你是为啥跑了，只是检测的话，用RNA酶抑制剂（如RNaseZAP）把电泳槽什么的都擦干净，配一块普通的1.2%琼脂糖胶，120V跑15min就够了，理想状态能看到两条rRNA条带，没有严重smear就说明这个样品还不错咯。最好有marker，DL2000就行。如果跑电泳是为了回收什么的...那就得做甲醛变性电泳或者PAGE，这个LZ自己查文献吧。
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-24 10:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭