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qmj911

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于双向电泳的几个问题

最近在跑双向，凝胶总是在染色和脱色过程中破成几块，已排除是凝胶的问题了。我想问问，除了小心操作外，还有没有其他的技巧什么的，不让胶破？还有就是，17cm的胶条第二向一般要跑多久，是不是一定要跑在底部?
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1楼 2012-05-23 10:01:43
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willschou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wsw2t at 2012-05-24 17:19:28
巧了，我也在做双向，我的胶没破过，只有一个技巧，就是一定要用比胶大的盘子，我的是24cm 的胶。然后第二向，就是看溴酚蓝，跑到底就OK了，我第一次跑的时候是师兄帮我封的胶槽，上槽液没漏，只跑了4个半小时就跑好 ...

请问溴酚蓝跑的比蛋白慢是什么原因呢？知道吗
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6楼2012-12-03 17:08:03
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wsw2t

银虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-05-24 23:45:00
巧了，我也在做双向，我的胶没破过，只有一个技巧，就是一定要用比胶大的盘子，我的是24cm 的胶。然后第二向，就是看溴酚蓝，跑到底就OK了，我第一次跑的时候是师兄帮我封的胶槽，上槽液没漏，只跑了4个半小时就跑好了，但第二次是我自己封胶封得不好，上槽液漏了，上下槽通了，跑了6个半小时都还不是很够！
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2楼2012-05-24 17:19:28
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主问具体些好吗？要不然我把MMB的2D电泳实验分册传给你？
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3楼2012-05-24 23:26:13
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 总是很热心的哈 2012-05-25 13:40:35
不好意思，回答上贴时我没有看清你的问题。
“凝胶总是在染色和脱色过程中破成几块，已排除是凝胶的问题了。”
建议：由模具取下凝胶放置凝胶在冷却盘时不要有气泡。把凝胶放入染色盘时也不要产生气泡，而后倒入考马斯亮蓝溶液，液面应覆盖凝胶。染色结束，应加入脱色液（无水乙醇：冰乙酸：水（体积比）=3：1:6），在脱色床上室温脱色。脱色结束的凝胶可发在蒸馏水中暂时保存，应尽快扫描保存图像。溴酚蓝应该是跑到凝胶底部才可关闭电源。
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4楼2012-05-24 23:45:57
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