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qmj911

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于双向电泳的几个问题

最近在跑双向,凝胶总是在染色和脱色过程中破成几块,已排除是凝胶的问题了。我想问问,除了小心操作外,还有没有其他的技巧什么的,不让胶破?还有就是,17cm的胶条第二向一般要跑多久,是不是一定要跑在底部?
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wsw2t

银虫 (初入文坛)

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-05-24 23:45:00
巧了,我也在做双向,我的胶没破过,只有一个技巧,就是一定要用比胶大的盘子,我的是24cm 的胶。然后第二向,就是看溴酚蓝,跑到底就OK了,我第一次跑的时候是师兄帮我封的胶槽,上槽液没漏,只跑了4个半小时就跑好了,但第二次是我自己封胶封得不好,上槽液漏了,上下槽通了,跑了6个半小时都还不是很够!
2楼2012-05-24 17:19:28
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主问具体些好吗?要不然我把MMB的2D电泳实验分册传给你?
3楼2012-05-24 23:26:13
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 总是很热心的哈 2012-05-25 13:40:35
不好意思,回答上贴时我没有看清你的问题。
“凝胶总是在染色和脱色过程中破成几块,已排除是凝胶的问题了。”
建议:由模具取下凝胶放置凝胶在冷却盘时不要有气泡。把凝胶放入染色盘时也不要产生气泡,而后倒入考马斯亮蓝溶液,液面应覆盖凝胶。染色结束,应加入脱色液(无水乙醇:冰乙酸:水(体积比)=3:1:6),在脱色床上室温脱色。脱色结束的凝胶可发在蒸馏水中暂时保存,应尽快扫描保存图像。溴酚蓝应该是跑到凝胶底部才可关闭电源。
4楼2012-05-24 23:45:57
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qmj911

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wsw2t at 2012-05-24 17:19:28
巧了,我也在做双向,我的胶没破过,只有一个技巧,就是一定要用比胶大的盘子,我的是24cm 的胶。然后第二向,就是看溴酚蓝,跑到底就OK了,我第一次跑的时候是师兄帮我封的胶槽,上槽液没漏,只跑了4个半小时就跑好 ...

哦,看来是我的盘子小了。
5楼2012-05-26 21:25:39
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willschou

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wsw2t at 2012-05-24 17:19:28
巧了,我也在做双向,我的胶没破过,只有一个技巧,就是一定要用比胶大的盘子,我的是24cm 的胶。然后第二向,就是看溴酚蓝,跑到底就OK了,我第一次跑的时候是师兄帮我封的胶槽,上槽液没漏,只跑了4个半小时就跑好 ...

请问溴酚蓝跑的比蛋白慢是什么原因呢?知道吗
6楼2012-12-03 17:08:03
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