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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC可以用来做蛋白的药代实验吗?蛋白59KD

大家好,我的融合蛋白59KD,要做药代实验,已经选定了双抗体夹心ELISA来做,昨天有一个老师说我只用这一种方法不行。。。特异性不一定强,所以让我再找一种方法。

     不知道能不能用HPLC来分析血清?我看别的HPLC做药代的都是化学药物,先把血样中得蛋白质给沉淀了才进柱子的(取血后,需要加抗凝剂抗凝,然后离心得血浆
,血浆需经沉淀蛋白或者萃取后,才可以进HPLC )

     可是我的待测物本身就是蛋白质,不知道能不能用HPLC?
     各路神仙,求求帮帮小女子吧!

[ Last edited by 阿娇阿娇 on 2012-5-18 at 09:52 ]
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-19 11:01:59
不知道你的蛋白要不要活性,如果要活性的话,肯定是不行的,不要活性我还不知道哦
2楼2012-05-18 14:52:01
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-05-18 14:52:01:
不知道你的蛋白要不要活性,如果要活性的话,肯定是不行的,不要活性我还不知道哦

谢谢!  
我是把蛋白药物注射到动物体内,然后取血,测它在血中的浓度,只要能测出浓度就行
3楼2012-05-18 15:32:25
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njgdmc

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-19 11:02:04
hplc的定蛋白多肽的技术文献应该有很多,你查阅就有了。当年日本岛津工作人员因此获得诺贝尔
4楼2012-05-19 00:41:18
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藤萝紫蔓

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

HPLC我不知道,我们实验室有用LC/MC技术对蛋白进行定量的,利用蛋白的某个特征多肽进行定量。。。
慢慢来,就能到达终点。
5楼2012-07-12 09:36:16
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 藤萝紫蔓 at 2012-07-12 09:36:16
HPLC我不知道,我们实验室有用LC/MC技术对蛋白进行定量的,利用蛋白的某个特征多肽进行定量。。。

谢谢你,我咨询了好多,答复都是不可以只用HPLC的,有用同位素标记和HPLC联用的
6楼2012-07-13 15:09:16
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greatet

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有测蛋白的水性柱子。但你的样品不知道要怎么处理才能跟血浆蛋白分开。
7楼2012-09-19 09:24:07
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七弦凝霜丶

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-07-13 15:09:16
谢谢你,我咨询了好多,答复都是不可以只用HPLC的,有用同位素标记和HPLC联用的...

想请问师姐,我做的一种18肽药物的药动,条件限制只能使用HPLC法,血浆样品沉淀萃取以后能和血浆蛋白基线分离,这样可以吗?绝对回收率60%左右这样可以吗
8楼2019-01-07 13:02:39
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